Спосіб визначення токсичності стічних вод
СПОСІБ ВИЗНАЧЕННЯ ТОКСИЧНОСТІ СТІЧНИХ ВІД шляхом впливу на мікрофлору активного мулу та порівняння дегідрогеназної активності та контролю за тим, що, якістю стічних вод, вплив на мікрофлору активного мулу здійснюють внесенням в дослідні проби досліджуваного компонента стічних вод в заданих різних концентраціях, перед визначенням дегідрогеназної активності проби витримують при протягом 5-15 хв і визначають дегйдрогеназную активність по кb на.
Н АВТОРСНОМУ СВІДЧЕННЯМ
ДЕРЖАВНИЙ КОМІТЕТ СРСР
ПО СПРАВАХ ВИНАХОДІВ І ОТНРЬГВФ (21) 3260764/28-13
: (22) 27.02.81 (46) 30.03,83 ° Бюл. N" l2 (72) К. Г. Лахіна, Л. І. Гамага та
А. С. Попов (53) 628.314.2(088.8) (56) 1.Калабіна М.М. Методи визначення токсичності промислових стічних вод та їх окремих компонентів.вЂ"
Гігієна та санітарія ". М., 1945, Ю 4-.
2. Методика визначення дегідрогеназної активності та окислювально-відновного потенціалу при технологічному контролі за роботою аеротенків.-Академія комунального господарства. М., 1970, с. 1-l4. (54) (57) СПОСІБ ВИЗНАЧЕННЯ ТОКСИЧНОСТІ. СТІЧНИХ ВОД шляхом впливу
3(59 С 12 Я 1/Щ,l/С 02 F 3/00 на мікрофлору активного мулу та порівняння дегідрогенаЗної активності мікроорганізмів у контрольній та дослідних пробах з використанням 2,3, 5-трифенілтетразолію хлористого, о т л:і ч а ю щ і " c, я тим, що, з метою підвищення точності визначення та забезпечення контролю за якістю стічних вод, вплив на мікрофлору активного мулу осуществ".компонента стічних вод у заданих різних концентраціях, перед визначенням дегідрогеназної активності проби витримують при
45-550С протягом 5-15 хв і визначають дегідрогеназну активність за кількістю утвореного формаеа на.
Винахід відноситься до проблеми охорони водойм від забруднення промисловими стічними водами, а саме до Ьіотестування компонентів стічних вод шляхом визначення їх токсичності до мікроорганізмів активного мулу за показником дегідрогеназної активності, що дозволить попередньо визначити і попередити негативний вплив 10 .
Недолік способу полягає у трудомісткості та тривалості визначення, а також можливості застосування його лише у спеціальних лабораторних умовах.
Зазначені обмежування відомого способу звужують можливість більш широкого проведення досліджень токсичності компонентів стічних вод, наприклад для оперативного вирішення питання про скидання окремих потоків стічних вод на біологічні очисні споруди, що містять речовини, токсичність яких до активного мулу не вивчена, а також виконання такого роду досліджень в умовах заводських лабораторій чи промислових очисних спорудах.
Найбільш близьким за технічною сутністю до пропонованого є спосіб визначення токсичності стічних вод, заснований на визначенні дегідрогеназної активності мулу при оцінці ефективності процесу біохімічного очищення стічних вод.
Спосіб реалізується шляхом впливу на мікрофлору активного мулу неочищеної та очищеної стічної води та порівняння дегідрогеназної активності мікроорганізмів у тому та іншому випадку з використанням
2,3,5-трифенілтетразолію хлористого, причому впливвпливових факторів оцінюється візуально по †інтенсивності забарвлення 2,3,5-трифенілтетраеолію хлористого при переході іе безбарвної окисленої форми у відновлену забарвлену (2) .
Недолік відомого способу для оцінки токсичності компонентів стічних вод полягає у використанні для аналізу стічної води без урахування вмісту в ній конкретних компонентів у відомих заданих концентраціях. (Для аналізу береться якийсь обсяг очищеної або неочищеної води, наприклад 10 мп або
1-24 від загальної кількості взятої для аналізу мулової суміші залежно від БПК повного, а не по концентрації компонентів, що містяться, Недоліками даного способу також є неможливість визначення конкретного компонента, який обумовлює токсичність стічних вод, неможливість визначення токсичної (не токсичної) концентрації компонентів стічних вод, тільки якісна оцінка токсичності стічних вод, але не кількісна, так як дегідрогенаена активність визначається візуально за інтенсивністю фарбування проби і неможливість оперативно: вирішити питання про допустимість з'росу окремих компонентів у стічні води, що спрямовуються на біологічні очисні споруди.
Ціль винаходу - підвищення токсичності аналізу, тобто. кількісне визначення токсичності компонентів стічних вод, шляхом визначення дегідрогеназної активності за кількістю формазану, що утворився, і, контроль за якістю стічних вод за вмістом в них окремих компонентів на рівні не токсичних концентрацій для мікроорганізмів активного мулу.
Зазначена" мета досягається тим, що при визначенні токсичності стічних вод шляхом впливу на
° Ф l0 мікрофлору активного або порівняння дегідрогеназної активності мікроорганізмів у контрольній та дослідних пробах з використанням2,3,5-трифенілтетразолію хлористого, вплив на мікрофлору активного мулу здійснюють внесенням у дослідні проби досліджуваного компонента стічних вод у заданих різних концентраціях, перед визначенням дегідрогеназної активності проби витримують при 45-55 С протягом 5о
15 хв і визначають дегідрогеназну активність за кількістю формазану, що утворився.
llo пропонованого способу в зразок активного мулу вносять досліджувану речовину в різних концентраціях, що дозволяє визначити без шкідливі концентрації компонентів стічних вод відносно ферментів дегідрогенаев мікроорганізмів активного мулу.
Спосіб дозволяє виявити токсичність не тільки вищого потоку стічної води, але і за рахунок якого компонента обумовлена токсичність стічної води, що дозволяє здійснювати контроль за якістю стічних вод і вживати відповідних заходів для забезпечення нормальної роботи очисних споруд за вмістом у стічних водах окремих компонентів на рівні їх нетоксичних.концентрацій до мікроорганізмів активного мулу.
На фіг. 1-3 наведено відповідно результати визначення токсичності до мікроорганізмів активного або алілацетату, ацетопропілацетату ним моноетаноламіну, які входять до складу стічних вод низки нафтохімічних виробництв, за їх впливом на дегідрогезну активність мулу. Як видно на фіг. більш токсичним є алілацетат та менш токсичним моноетаноламін. При цьому в дії моноетаноламіну на дегідрогеназна активність відзначається двофазність - спочатку активність ферменту підвищується, потім вЂ" знижується.
08245 4 го на модельному стоку, до складу якого входять тільки біогенні елементи та легкоокислювані сполуки, наприклад етиленгліколь. Якщо в досвід беруть мулову рідину з промислового аеротенку, то мулпопередньо промивають водопровідною водою; в день постановки опи-„ та визначають концентрацію мулу в аеротенці, .і центрифугують при
2000 оЬ/хв протягом 5 хв. Насаджувальну рідину зливають. До отриманого осаду, в одну пробірку доливають 4 мл фосфатного буфера з рН=7,2 контрольна проСа), а в решту 6 пробірок вносять по 4 мл водного розчину алілацетату в концентраціях 15 45-75,150,450
У кожну пробірку додають по
1 мл 0,4 i свіжоприготовленого розчину 2,3,5-трифені@тетразолію хлористого на фосфатному буфері.
Вміст пробірок добре перемішують та інкубують протягом
3 год. Потім додають у всі пробірки по 0,5 мл крижаної оцтової кислоти і центрифугують протягом
5 хв при 2000 об/хв.
Надосадову рідину зливають, до осаду в кожну пробірку додають по 10 мл спирту етилового, перемішують і залишають на 30 хв.
Потім, для повнішої екстракції формазану з активного мулу, проби підігрівають на водяній бані при t 45 °C протягом 15 хв (до знебарвлення осаду) перемішують, охолоджують.
Центрифугують протягом 5 хв при 2000 об/хв. Відібрану рідину колориметрируют на фЕК,«56 І, світлофільтр У 5, кювети з товщиною шару 5 мм. Як стандарт беруть етиловий спирт.
Кількість формазану в пробах визначають за калірувальною кривою, Дегідрогеназну активність і питому дегідрогеназну активність мулу розраховують за такими формулами.
Приклад 1. Визначення токсичності алілацетату.
У сім центрифужних пробірок вносять по 5 мл мулової рідини мулову рідину в досвід беруть з лабораторного аеротенку, працююче