Стимулятор імунологічної резистентності організму
Використання: в медицині, а саме у фармакології, і може бути використане як стимулятор імунологічної резистентності організму. Сутність: як засіб використовують екстракт кореня солодки, який отримують шляхом екстрагування коріння солодки фізіологічним розчином і використовують для стимуляції резистентності у осіб з ослабленим імунітетом. 1 мул, 4 табл
(19) ІЛ,1 (11) (51) 5 А61К35 78
Комітет України з патентів та товарних знаків
ОПИС ВИНАХОДУ „„„„, ДО ПАТЕНТУ
1 (21) 5058142/14 (22) 24.09.92 (46) 15.10.93 Бюл. Іа 37 вЂ" 38 (71) Мале підприємство "Європа" (72) Терновий АП.; Дмитрієнко Н.В.; Михалєв В.Ю.;
Рибкіна PA. Куликова СА; Чабан Л.М. (73) Мале підприємство "Європа" (54) СТИМУЛЯТОР ІМУНОЛОГІЧНОЇ РЕЗИСТЕНТНОСТІ ОРГАНІЗМУ (57) Використання: в медицині, а саме у фармакології, і може бути використане як стимулятор імунологічної резистентності організму. Сутність: як засіб використовують екстракт кореня солодки, який отримують шляхом екстрагування коріння солодки фізіологічним розчином і використовують для стимуляції резистентності у осіб з ослабленим імунітетом. 1 іл. 4 табл
Винахід відноситься до медицини, фармакології та імунології та стосується способу застосування водного екстракту кореня солодки як імуностимулятора.
Може бути використаний для стимуляції резистентності в осіб із ослабленим імунітетом.
Відомі фармакологічні препарати, що активують неспецифічні фактори імунітету. Однак більша частина цих препаратів вибірково впливає лише на окремі показники імунітету, вони неефективні при пероральному надходженні в організм або не позитивно впливають на антибактеріальну резистентність.
Найбільшблизьким за призначенням аналогом є препарат кукумаріозид, що містить також як екстракти солодки у своєму складі тритерпенові глюкозиди, що позитивно впливають на активність імунологічних феноменів. Однак кукумаріозид недостатньо ефективний за рядом імунологічних показників, має ряд протипоказань до застосування і не має настільки потужного загальнозміцнювального впливу на організм, як екстракти солодки, які активно впливають на омолодження організму.
Є відомості про антимікробні властивості препаратів з кореня солодки щодо низки патогенних мікроорганізмів (стафілокок, туберкульозні мікробактерії, кишкова паличка, кандида, вагінальна трихомонада). Було встановлено. що антибактеріальні властивості препаратів солодки пов'язані з бактеріостатичним дією солей гліциретинової кислоти, що знаходяться в їх складі.
Даних про позитивний вплив екстрактів солодки на імунологічну резистентність організму не виявлено.
Метою винаходу є розробка ефективної схеми використання екстрактів солодки для стимуляції імунологічної резистентності. Ця мета досягається тим, що використовувані екстракти солодки готуються в умовах, за яких біологічно активні сполуки, що входять до його складу, не руйнуються, а також за рахунок оптимального підбору використовуваної дози препарату і схем його застосування.
Сутність винаходу полягає у вишукуванні нових засобів природного походження для розширення асортиментних засобів профілактики та лікування.
Приготування водного екстракту кореня солодки проводилося шляхом подрібнення.
55 ня сухого кореня з подальшим екстрагуванням фізіологічним розчином при рН 7,0, Для оцінки впливу екстрактів кореня солодки на клітинний і гуморальнийімунітет щурам із середньою масою тіла 240 r препарат вводився внутрішньошлунково 4 рази з розрахунку 2 мг/кг при кожному введенні.
Схема введення наступна: перші два введення вЂ" щодня по одному введенню в день, потім дводенний інтервал між наступними двома щоденними введеннями, Контрольним тваринам вводився фізіологічний розчин, У кожній групі було по 12 тварин. Через добу після четвертого введення всі щури одночасно піддавалися тестуванню за такими показниками: фагоцитарна активність нейтрофілів, що визначається за відсотком фагоцитуючих клітин, тест-мікробом служили Е, Coll; активність комплементу сироватки крові по 50 гемолізу; функціональна активність Т-і В-лімфоцитів, що визначається за відсотком розеткоутворювальних клітин; рівень природних антитіл до "0" сальмонельозного антигену реакцією пасивної гемоглютинації, використовуючи для цього стандартний діагностикум
МНДІ епідеміології та мікробіології ім.
Результати досліджень піддавалися статичній обробці методом критерію
Фішера-Стьюдента. Зміни показників вважали достовірними за P = 0,05.
Отримані дані представлені у табл. 1.
Аналіз представлених у табл, 1 результатів показує, що введення тваринам екстрактів кореня солодки позитивно впливає на більшість із використовуваних імунологічних тестів, причому займають найбільш важливе місце серед показників неспецифічної резистентності організму.
Вивчення профілактичного ефекту екстракту кореня солодки для підвищення імунологічної резистентності організму до бактеріальної інфекції проводили у модельному експерименті на мишах масою
25 вЂ" 30 р. заражених Sallm. типімуріум.
Інокулят для зараження тварин готували так.Добову культуру бактерій, вирощену на м'ясопептонному агарі, змивали стерильним фізіологічним розчином і розводили його до отримання суспензії клітин з концентрацією 1.10 мікробних клітин в 1 мл за стандартом мутгооог99 ності ГІБК ім. Л,А.Тарасевича. Величину до
ЛД5о, ЛД1оо мікробної суспензії визначали в попередньому експерименті за Ван дер Варденом на мишах тієї ж партії, У модельному експерименті використовували дозу суспензії бактерій, що викликає у контрольних тварин 100-го загибель протягом 7 діб. Схема введення екстракту солодки та затравальної дози бактерій відповідає постановці експерименту на щурах, Відтитрована завис бактерій вводилася внутрішньочеревно через добу після четвертої ін'єкції. Контрольним тваринам, які отримували замість екстракту солодки фізіологічний розчин, вводилася та ж доза бактеріальної суспензії, Облік загибелі тварин у контрольній та дослідній групах проводився протягом 7 діб.
Результати експериментів представлені в табл, 2, З представлених у табл. 2 результатів експерименту видно, що чотириразове введення екстракту солодки підвищує стійкість тварин до бактеріальної інфекції, що проявляється в статистично достовірному віддаленні загибелі заражених тварин на 6 діб, Встановлений ефект не пов'язаний з бактерицидними властивостями, а не результатом надходження в організм разом з екстрактом солодки компонентів, що мають бактерицидні властивості. Цей висновок заснований на результатах прямого визначення бактерицидних властивостей водного екстракту кореня солодки, що використовується, який вивчали методом посіву тест-культури.
Staphylococcus aureus P-209 та Sallm.
typhymurium на живильний агар,містить у своєму складі 2-ний розчин екстракту, що застосовується. У поживний агар контрольних чашок вносили замість екстракту солодки відповідний обсяг фізіологічного раст,ору. Результати цих експериментів представлені у табл. 3.
На кресленні представлені фотокопії бактерій у чашках Петрі. Чашка 1 вЂ" посів культури Staphylococcus aureus досвід, Чашка 2 вЂ" відповідний контроль. Чашка 3вЂ" посів культури Sallm. typhymur. досвід, Чашка 4 вЂ" відповідний контроль.
Іе представлених результатів випливає, що кількість колоній, що виросли, на середовищах з екстрактом кореня солодки не менше. ніж у контрольних чашках, а у разі посівів культури Staphyl. aureus їх на середовищі з екстрактом навіть значно більше. Про відсутність антимікробної активності екстракту кореня солодки свідчить також і характер зростання колоній. Їх зовнішній вигляд і число свідчить лише про позитивний вплив вмісту екстракту, що випробовується, на зростання бактерій, що мабуть, пояснюється наявністю в його складі легко засвоюваних поживних речовин (вітамінів, цукрів). Можливо їх наявністю і пояснюється адаптогенний вплив екстрактів солодки на організм до впливу шкідливих факторів. (Див. табл. 4). З представлених у табл. 4 даних можна відзначити, що позитивний ефект тривалого введення екстракту солодки у період розвитку бактеріальної інфекції проявляється вже через добу після введення.
Таким чином на підставі отриманих результатів випливає, що виїдання водного екстракту кореня солодки надаєстимулюючий вплив на активність факторів імунітету, що сприяє підвищенню резистентності імунології від бактеріальної інфекції. (56) Вічканова С.А. та ін. Питання вивчення та використання солодки в СРСР. Наука, 1966. с, 176 - 179.
Таблиця 1 вплив водного екстракту кореня солодки на імунну систему при чотириразовому внутрішньошлунковому введенні дозі 1 мл/кн (аналіз через добу після четвертого введення)
*Наявність статистично достовірної різниці між контролем та досвідом.
Віддалення терміну загибелі у мишей, які отримували екстракт кореня солодки до зараження смертельною дозою бактерій.
*Наявність статистично достовірної різниці між контролем та досвідом.
Аналіз бактерицидної дії водного екстракту кореня солодки на культуру бактерій
*Наявність статистично достовірної різниці між контролем та досвідом, Таблиця 4
Ефективність екстрактів кореня солодки при додатковому його введенні у період розвитку бактеріальної інфекції
Кількість препаратів, що вводяться, введені екстрак-живоВідсоток тварин, що вижили, за період, що пішов після зараження
1 добу. 2 добу. 3 доби, 4 доби. 5 діб (6 діб. 7 діб та солодки тних у досвіді
Екстракт кореня солодки
ЛД о мікробних клітин
100 87,5* 50,0* 50,0* 12,5 12,5 0
5 (1 підкріплююча) 16
43,7* 43,7* по к пляючі
93,7 50,0 25,0 18,7 18,7 0
ЛД оо мікробних клітин конт оль
*Наявність статистично достовірної різниці між контролем і досвідом;
Упорядник І, Губарєва
Техред M. Моргентал Коректор Е, Папп
НВО Пошук" Роспатенту
113035, Москва, >К-35, Рауї:ока . б. 4/5
Виробничо-видавничий ком, інат:! а -. i æãîðîä вул.Гагаріна, 101
СТИМУЛЯТОР ІМУНОЛОГІЧНИЙ РЕЗИСТЕНТ
1. Застосування екстракту кореня солодки (glycyrrhiza) як стимулятор імунологічної рееїстентності організму, 12
2. Застосування п,1, яке відрізняється тим, що використовують екстракт кореня солодки, отриманий шляхом обробки кореня солодки фізіологічним розчином при рН