Вакцина для профілактики цінурозу та тонкошейного цистицеркозу сільськогосподарських тварин
Власники патенту UA 2333769:
Винахід відноситься до галузі ветеринарної паразитології. Вакцина містить дводобову культуру лярвоцист Multiceps multiceps, дводобову культуру лярвоцист Taenia hydatigena, середу 199, сироватку крові великої рогатої худоби, бензилпеніциліну калієву сіль, стрептоміцину сульфат, формалін і гідроокисвюї. очна культура лярвоцист Multiceps multiceps - 1,1·10 3 -1,2·10 3 екз./мл, дводобова культура лярвоцист Taenia hydatigena - 1,1·10 3 -1,2·10 3 екз./мл, сироватка крові великої рогатої худоби 8, 0-10,0, бензилпеніциліну калієва сіль 0,018-0,02, стрептоміцину сульфат - 0,029-0,03, формалін - 8,0-10,0, гідроксид алюмінію - 8,0-10,0, середа 199 інше. Вакцина ефективна проти цінурозу і тонкошейного цистицеркозу сільськогосподарських тварин, нешкідлива, має високу імуногенність і тривалий термін зберігання.
Винахід відноситься до галузі ветеринарної паразитології.
Проблема цінурозу в тваринницьких господарствах України та багатьох інших країн не втратила актуальності й досі. Цінурозні інвазії – це захворювання овець, кіз, великої рогатої худоби, рідше – інших копитних та гризунів. Майже всі захворілі на цінуроз тварини гинуть, а вимушено прирізані дають недоброякісне м'ясо. Тому основним завданням є різке зниження цієї інвазії, а потім повна її ліквідація-девастація шляхом створення в природі таких умов, за яких збудники цієї інвазії не могли б існувати. Основним методом боротьби з ценурозами тварин є їхня імунізація. Результати імунізації доводять, що вже в перший рік її застосування кількість хворих тварин зменшується у 15-20 разів. На другий рік їїзастосування кількість хворих тварин зменшується до 0,5-0,01% від загального поголів'я молодняку, а окремих випадках і до повної відсутності хворих тварин. Третій рік застосування імунізації новонароджених тварин зазвичай характеризується відсутністю інвазованих серед них. Інвазовані ж мультицептоз собаки, що є основним джерелом зараження, через 6-7 місяців після зараження самозвільняються від збудника. Повторного ж зараження собак мультицептоз не відбувається через відсутність у господарствах цінурозних тварин.
Таким чином, використання протиоценурозної вакцини в тваринницьких господарствах, розташованих у різних кліматичних зонах, з різними прийомами господарювання та неоднаковою епізоотичною ситуацією щодо ценурозу, є потужним прийомом боротьби та профілактики цієї інвазії.
Відома вакцина для профілактики лярвальних теніїдозів сільськогосподарських тварин, що містить дводобову культуру лярвоцист Multiceps multiceps, живильне середовище на основі середовища 199 і сироватки крові, бензилпеніциліну калієву сіль, стрептоміцину сульфат, мертіолят3 і гідроок. 15.06.1986 ).
Недоліком відомих вакцин є вузький спектр дії, невисока імуногенність і короткий термін зберігання.
Однак спосіб отримання цієї вакцини складний, а імуногенність її невисока.
Вакцини, ефективні як проти ценурозу, і проти тонкошейного цистицеркозу сільськогосподарських тварин, із рівня техніки невідомі.
Завданням цього винаходу є розробка вакцини, ефективної як проти ценурозу, так і проти тонкошейного цистицеркозу сільськогосподарських тварин, нешкідливої, що має високу імуногенність і тривалий термін зберігання.
Поставлене завдання вирішується за рахунок того, що згідно винаходу вакцина для профілактики ценурозу і тонкошейного цистицеркозу сільськогосподарських тварин містить дводобову культуру лярвоцист Multiceps multiceps і дводобову культуру лярвоцист Taenia hydatigena, середу 199, сироватку крові іна сульфат, формалін та гідроксид алюмінію при наступному співвідношенні інгредієнтів (в об.%):
дводобова культура лярвоцист
| Multiceps multiceps | 1,1·10 3 -1,2·10 3 екз./мл |
| лярвоцист Taenia hydatigena | 1,1 · 10 3 -1,2 · 10 3 екз./мл |
| сироватка крові великої рогатої худоби | 8,0-10,0 |
| бензилпеніциліну калієва сіль | 0,018-0,02 |
| стрептоміцину сульфат | 0,029-0,03 |
| формалін | 8,0-10,0 |
| гідроксид алюмінію | 8,0-10,0 |
| середа 199 | інше |
Технічний результат, що досягається винаходом, полягає в тому, що отримана вакцина нешкідлива, має тривалий термін зберігання, високу імуногенність і оберігає сільськогосподарських тварин від зараження як ценурозом, так і тонкошейним цистицеркозом.
Винахід ілюструється наведеними нижче прикладами.
Приклад 1. Отримання вакцини
Собак інвазують личинками ланцюгів Multiceps multiceps та Taenia hydatigena (далі - відповідно М. multiceps та Т. hydatigena). Потім проводять дегельмінтизацію експериментально інвазованих собак. Відмивають М. multiceps і Т. hydatigena у водопровідній воді. Відокремлюють зрілі членики М. multiceps і Т. hydatigena. Руйнують зрілі членики з наступним відмиванням яєць у водопровідній воді. Яйця М. multiceps та Т.hydatigena роздільно послідовно витримують у шлунковому соку протягом 1 години, а потім у кишковому соку протягом 15 хвилин при температурі 37°С. Склад шлункового соку (рН 1,5-2,0): пепсин (медичний) – 1,0 г, хлористоводнева кислота – 1,0 мл, вода дистильована – до 100,0 мл. Склад кишкового соку (рН 7,1-7,3): панкреатин – 1,0 г, жовч великої рогатої худоби – 10,0 мл, вода дистильована – до 100,0 мл.
Звільнені від яйцевих оболонок онкосфери відмивають від залишків кишкового соку середовищем культивування, після чого онкосфери переносять у свіжу порцію середовища культивування і поміщають термостат на 48 годин при температурі 37°С. У процесі 48-годинного культивування онкосфери розвиваються у лярвоцисти. Середовище культивування готують з (про.%): сироватки крові великої рогатої худоби - 8,0, бензилпеніциліну калієвої солі - 0,018, стрептоміцину сульфату - 0,029, середовища 199 - інше.
Кількість лярвоцистів підраховують для кожного виду збудників окремо. Доводять кількість лярвоцист М. Multiceps до 1,1·10 3 екз./мл і Т. hydatigena до 1,1·10 3 екз./мл з урахуванням подальшого додавання формаліну (8,0 об.%) та гідроксиду алюмінію (8 ,0 об.%).
Підготовлені за описаною методикою культури з лярвоцистами змішують у рівних обсягах. Готову вакцину при постійному перемішуванні розливають у флакони ємністю 200 мл, контролюють стерильність і нешкідливість.
Вакцину готують згідно з прикладом 1, але відмиті яйця М. multiceps і Т. hydatigena після руйнування зрілих члеників окремо послідовно витримують у шлунковому соку протягом 1,5 години, а в кишковому соку - протягом 20 хвилин при температурі 38°С. Відмиті від залишків кишкового соку онкосфери поміщають термостат на 48 годин при температурі 38°С. Середакультивування містить (про.%): сироватка крові великої рогатої худоби - 10,0, бензилпеніциліну калієва сіль - 0,02, стрептоміцину сульфат - 0,03, середа 199 - інше. Доводять кількість лярвоцист М. Multiceps до 1,2·10 3 екз./мл і Т. hydatigena до 1,2·10 3 екз./мл з урахуванням подальшого додавання формаліну (10,0 об.%) та гідроксиду алюмінію (10 ,0 об.%).
Підготовлені за описаною методикою культури з лярвоцистами змішують у рівних обсягах. Готову вакцину при постійному перемішуванні розливають у флакони ємністю 250 мл, контролюють стерильність і нешкідливість.
Імунізації вакциною були піддані ягнята (10 гол.) та телята (10 гол.). Молодняк сільськогосподарських тварин імунізують не раніше ніж 1,5-місячного віку, двічі з інтервалом 10-12 діб. Вакцину вводять внутрішньом'язово з внутрішньої сторони стегна дозі 1 мл на голову.
Напруженість імунітету перевіряють експериментальним зараженням імунізованих тварин.
Імуногенність вакцини контролюють реакцією латекс-аглютинації (РЛА) за титром антитіл у сироватці крові експериментальних тварин. Титр антитіл вважають задовільним за позитивних результатів РЛА при розведенні сироватки 1:32; 1:64.
Результати дослідження показали, що вакцина зберігає імуногенність не менше 15 років при температурі зберігання 6-10°С.
Тривалість імунітету у імунізованих тварин становить 1 рік і більше.
Таким чином, отримана вакцина ефективна як проти ценурозу, так і проти тонкошейного цистицеркозу сільськогосподарських тварин, нешкідлива, має високу імуногенність і тривалий термін зберігання.
Вакцина для профілактики цінурозу та тонкошейного цистицеркозу сільськогосподарських тварин, що містить дводобову культуру лярвоцистMulticeps multiceps, дводобову культуру лярвоцист Taenia hydatigena, середу 199, сироватку крові великої рогатої худоби, бензилпеніциліну калієву сіль, стрептоміцину сульфат, формалін і гідроксид алюмінію при наступному співвідношенні інгредієнтів,