Визначення білка у зерні за методом К’єльдаля
Визначення білка в зерні за методом К'єльдаля - розділ Хімія, Харчова хімія Необхідні Реактиви І Посуд: 33 % Розчин &.
Необхідні реактиви та посуд:
33 % розчин ΝаОН, каталізатор для спалювання білка, що містить селен, концентрована сірчана кислота, змішаний індикатор для титрування, 0,1 М розчин ΝаОН, 0,1 М розчин Н2SO4.
Колба К'єльдаля, конічна колба місткістю 250 см³, циліндри місткістю 25 та 50 см³, перегінна колба місткістю 500 см³, піпетки місткістю 25 та 10 см³, електрична плитка, краплеуловлювач, водяний холодильник.
Витрата зерна 1г однією аналіз.
У скляній пробірці зважують 1 г борошна досліджуваного зразка з точністю до четвертого знака. Вміст пробірки переноситься точно в суху колбу К'єльдаля. Порожню пробірку зважують і по різниці між першим і другим зважуванням знаходять масу взятої для спалювання навішування борошна. Циліндром відмірюють 15 см³ концентрованої сірчаної кислоти. Кислотою змивають стінки колби і змочують навішування борошна. Додають 1-1,5 г каталізатора спалювання, колбу закривають спеціальною скляною насадкою або лійкою. Колбу похило встановлюють на електричній плиті та спалюють зразок обов'язково під тягою. Коли рідина в колбі набуде зеленого кольору, спалювання продовжують ще 10 - 15 хвилин, потім дають колбі охолонути. Після охолодження приступають до перегонки. У колбу К'єльдаля невеликими порціями по стінці доливають 30-50 см 3 дистильованої води, збирають спеціальну установку для перегонки і починають перегонку. За відсутності установки вміст колби К'єльдаля переносять у термостійку перегінну колбу місткістю 500 см³, в якій буде здійснюватися перегонка, при цьому колбу К'єльдаля кілька разів обполіскують дистильованою водою із'єднують з досліджуваним зразком. Перегінна колба встановлюється на плитці, приєднується до краплеуловлювача та холодильника. Кінець холодильника повинен бути опущений у приймальну колбу місткістю 250 см³, що містить 25 см³ 0,1 М сірчаної кислоти з кількома краплями змішаного індикатора. Перегінну колбу закривають пробкою, в якій разом з краплеуловлювачем вставлена ділильна лійка або гумова трубка зі скляною лійкою. Через вирву в перегінну колбу на початку нагрівання приливається 50 см 33 % розчину ΝаОН для нейтралізації кислоти. Перегонку проводять протягом 30 хвилин, щоб об'єм рідини в приймальній колбі подвоїться, потім приймальну колбу опускають так, щоб кінець холодильника був вище рівня рідини в приймальній колбі, продовжують перегонку ще 5 хвилин. Надлишок кислоти в приймальній колбі відтитрують 0,1 М розчином сірчаної кислоти до переходу малинового забарвлення змішаного індикатора зелену. Титруванням визначається кількість сірчаної кислоти, нейтралізованої аміаком, що виділився при відгоні. При цьому 1 см 0,1 М розчину гідроксиду натрію відповідає 1,4 мг або 0,0014 г азоту. Вміст білка у досліджуваному зразку зерна розраховують за формулою 1.1:
N== , (1.1)
де: а-кількість 0,1 М розчину Н2SO4, взятого на аналіз, см ;
б-кількість 0,1 М розчину гідроксиду натрію, що пішов на
титрування надлишку кислоти, см ;
н-маса навішування борошна, г;
W- масова частка вологи в муці, % а.с.в.;
6,25 - коефіцієнт перерахунку вмісту азоту на білок для
Вміст білка в ячмені має перевищувати 12,0 %.