Вплив пептидів жовчного міхура при гострому холециститі на імунітет та «кисневий градієнт».
Д.м.н. Сопуєв А.А., Колігів Б.М.Національний хірургічний центр Киргизької Республіки, м. Бішкек
Незважаючи на великі досягнення в хірургічному лікуванні хворих на гострі холецистити, ця проблема, як і раніше, є однією з провідних у невідкладній хірургії. Це щорічним збільшенням захворюваності ОХ як у світі, і у Киргизькій Республіці. Це свідчить про те, що наші знання про патогенез ОХ недостатні.
Вплив гострого запалення жовчного міхура на імунітет вивчався і продовжує вивчатися досі. Встановлено, що за ОХ в організмі хворого розвивається пригнічення імунітету, що супроводжується зменшенням рівня імуноглобулінів та порушеннями клітинного імунітету.
Ретельно у час вивчені показники «кисневого градієнта» при ОХ. Встановлено, що у організмі при ОХ розвивається гіпоксемія.
Пригнічення клітинного та гуморального імунітету при ОХ пояснюється впливом продуктів запалення та нейрореципрокними впливами запаленого ЗП на організм. Разом з тим у літературі є поодинокі дослідження про вплив найзапаленішого ЖП на імунітет та «кисневий градієнт». У той же час це ускладнює наукове обґрунтування профілактики та лікування депресії імунітету та гіпоксемії при хірургічному лікуванні ОХ.
Метароботи:- вивчення впливу гуморальних факторів жовчного міхура хворих на хронічні калькулозні, гострі катаральні, флегмонозні та гангренозні холецистити після лапароскопічної холецистектомії на імунітет і «кисневий градієнт» в експерименті на кролик.
Загальна характеристика клінічного матеріалу. Клініко-лабораторнідослідження виконані у 130 хворих на ОХ, що надійшли в НХЦ МОЗ КР за період 1999-2002 р.
В основній клінічній групі було 130 хворих на ОХ: 61 хворий на хронічні калькульозні холецистити (ХКГ), 12 хворих на гострі катаральні холецистити (ОКХ), 45 хворих на гострі флегмонозні холецистити (ОФХ) та 12 хворих на гострі ГГХ.
З усіх 130 прооперованих хворих 114 склали жінки та 16 чоловіків. ОКХ у 11 жінок та 1 чоловіка, ОФГ у 36 жінок та 9 чоловіків, ОГХ у 4 чоловіків та 8 жінок та ХКХ у 59 жінок та 2 чоловіків. Середній вік хворих становив 48,6±2,3 років.
Характеристика експериментального матеріалу. Експерименти проведені в літньо-осінній період 2000 р. на 70 безпородних кроликах обох статей, масою від 2 до 3 кг. Усі тварини до експериментів містилися у віварії щонайменше 2-х тижнів, де вони перебували на звичайному раціоні, затвердженому ГОСТом годування тварин. Обстеження імунітету та «кисневого градієнта» проводили до дослідів (фон), на 15-й день внутрішньом'язового введення пептидних фракцій, а також на 10-й, 20-й та 30-й дні (відповідно 25-й, 35-й, 45) -і дні досвіду) після закінчення 15-денного внутрішньом'язового введення. Пептидні фракції у наших дослідах тваринам вводилися внутрішньом'язово у дозі 1 мг/кг маси тіла. Перед введенням пептидні фракції розлучалися у стерильному фізіологічному розчині. Препарати вводили один раз на добу протягом 15 днів. Як контроль (препарату порівняння) 7 тварин у такому ж обсязі вводився стерильний 0,9% розчин хлориду натрію в ті ж терміни.
Робота з тваринами: До початку проведення експериментів у тварин ретельно вистригали шерсть у пахвинній ділянці лівого стегна. Протягом 2-х тижнів до початку дослідів щодня один раз на добу, кожну тварину поміщали на стіл,і після обробки 1% спиртовим розчином йоду виробляли одноразовим шприцем з голкою укол. Таке 2-тижневе тренування тварин дозволило нам виробити «динамічний стереотип» у них поведінки і виключити вплив больового постін'єкційного стресу на показники, що вивчаються.
Отримання крові та плазми: Кров через силіконовий катетер із лівого шлуночка серця, a. та v. pulmonalis забирали в силіконований посуд з цитратом натрію (3,8%) у співвідношенні 9:1 і відразу ж центрифугували протягом 10 хв. при 1500 об/хв. Отриману плазму відразу відсмоктували в силіконований посуд та застосовували в експерименті. Крім того, кров поміщали в кювету електрокоагулограф Н-334 (333) і записували показники електрокоагулограми.
Експериментальні кролики були розбиті на такі групи:
1. 7 тварин, у яких було обстежено загальне тло, що характеризує стан клітинного, гуморального імунітету та «кисневого градієнта». Цим же тваринам надалі вводився фізіологічний розчин (група порівняння).
2. 7 кроликів, у яких було досліджено стан імунітету та «кисневого градієнта». Однак їм надалі внутрішньом'язово вводилася пептидна фракція ХКХG1 протягом 15 днів.
3. 7 кролів, яким після фонового обстеження 15 днів внутрішньом'язово вводилася фракція ХКХG2.
4. 7 кроликів, що піддавалися, фоновому обстеженню та їм внутрішньом'язово вводилася фракція ХКХG3.
5. 7 кроликам після фонового обстеження внутрішньом'язово вводили пептидну фракцію ХКХG4.
6. 7 кроликів також досліджували, до початку дослідів та ним внутрішньом'язово вводився, пептид ОКХG.
7. 7 кролів після фонового обстеження протягом 15 днів отримували внутрішньом'язово ін'єкції пептидної фракції ОФХG1.
8. Після фонового обстеження 7кролів протягом 15 днів внутрішньом'язово отримували пептидну фракцію ОФХG2.
9. Після фонового обстеження 7 кроликів отримували внутрішньом'язово пептидну фракцію ОФХG3.
10. Після фонового обстеження 7 кроликам внутрішньом'язово протягом 15 днів вводили пептид ОГХG.
Отриманий матеріал опрацьовано за Стьюдентом методами варіаційної статистики для пов'язаних і не пов'язаних між собою спостережень та обчислено показник достовірності відмінностей (Р).
Результати своїх досліджень. З запалених віддалених ЖП хворих на ХКХ після ЛХЕ виділяються 4, з ОКХ-1, з ОФХ – 3 та ОГХ –1 пептидна фракція. Всі виділені пептидні фракції мають здатність впливати на показники «кисневого градієнта» та імунітету. У хворих на ХКХ з 44,3±1,9 мм рт.ст. збільшено до 46,2±1,2 мм рт.ст. (P
1. У хворих на хронічні калькульозні, гострі катаральні, флегмонозні та гангренозні холецистити до лапароскопічної холецистектомії виявляється депресія клітинного та гуморального імунітету, гіпоксемія, гіперкапнія та накопичення в крові основних сполук.
2. Гуморальні фактори, виділені з жовчних міхурів у хворих на гострий холецистит, після 15-ти денного внутм'язового введення в організмі тварин, так само як і у хворих, формують депресію клітинного, гуморального імунітету, гіпоксемію, гіперкапнію та накопичення основних сполук у крові.
3. Виділені гуморальні фактори циркулюють у крові хворих на гострі холецистити та експериментальні тварини після 15-ти денного внутрішньом'язового введення.
4. Ці гуморальні фактори запалених жовчних міхурів в організмі хворих на гострі холецистити та експериментальні тварини локалізуються в структурі «білкової сорочки» еритроцитів.
5. Локалізація цих гуморальнихфакторів у структурі «білкової сорочки» еритроцитів порушує процеси приєднання та віддачі кисню, вуглекислоти в організмі хворих на гострі холецистити та експериментальні тварини, що проявляється гіпоксемією, гіперкапнією та накопиченням основних сполук у крові.
Список термінологічних скорочень
АКТ – аутокоагуляційний тест; Ат III - антитромбін III; ВВ - буферні основи; ВЕ – надлишок підстав; ВЕecf – надлишок основ у позаклітинній рідині; ЖП - жовчний міхур; ІФІ - інтегральний фагоцитарний індекс; КЩР – кислотно-лужна рівновага; ЛХЕ - лапароскопічна холецистектомія; НСТ - нітросиній тетразолій; -НСО3 - бікарбонат; ОКХG - пептидна фракція, виділена з гострих катаральних жовчних міхурів; ОФХG1, G2, G3 - перша, друга та третя поліпептидна фракція, виділена з гострих флегмонозних жовчних міхурів; ОГХG - пептидна фракція, виділена з гострих гангренозних жовчних міхурів; ПДФ - продукти деградації фібрину; П/я - паличкоядерні лейкоцити; рН – активність іонів водню; СЦК - сумарний цитотоксичний коефіцієнт; С/я – сегментоядерні лейкоцити; ТПГ – толерантність плазми до гепарину; ФА – фібринолітична активність; ФП - фагоцитарний показник; ХКХG1, G2, G3, G4 - перша пептидна фракція, виділена з хронічних калькульозних жовчних міхурів; ЦП – кольоровий показник; IgA, IgM, IgY - імуноглобуліни.