Живильне середовище

Поживне середовище- однокомпонентний або багатокомпонентний субстрат, що використовується для культивування мікроорганізмів або культур клітин вищих організмів.

Зміст

  • бутипоживними, тобто містити в легко засвоюваному вигляді всі речовини, необхідні задоволення харчових і енергетичних потреб. При культивуванні ряду мікроорганізмів у середовищі вносять фактори росту - вітаміни, деякі амінокислоти, які клітина не може синтезувати.
  • матиоптимальнуконцентрацію водневих іонів - pH, оскільки тільки при оптимальній реакції середовища, що впливає на проникність оболонки, мікроорганізми можуть засвоювати поживні речовини.
Для більшості патогенних бактерій оптимальне слаболужне середовище (pH 7,2-7,4). Виняток становлять холерний вібріон - його оптимум знаходиться в лужній зоні (pH 8,5-9,0) і збудник туберкульозу, що потребує слабокислої реакції (pH 6,2-6,8). Щоб під час зростання мікроорганізмів кислі або лужні продукти їх життєдіяльності не змінили pH, середовища повинні володіти буферністю, тобто містити речовини, що нейтралізують продукти обміну.
  • бутиізотонічнимидля мікробної клітини; тобто осмотичний тиск у середовищі має бути таким самим, як усередині клітини. Для більшості мікроорганізмів оптимальне середовище, що відповідає 0,5% розчину натрію хлориду.
  • бутистерильними, оскільки сторонні мікроби перешкоджають зростанню досліджуваного мікроба, визначенню його властивостей і змінюють властивості середовища.
  • щільні середовища повинні бутивологимиі мати оптимальну для мікроорганізмів консистенцію.
  • володіти певнимокислювально-відновнимпотенціалом, тобто співвідношенням речовин, що віддають і приймають електрони,виражається індексом RH2. Наприклад, анаероби розмножуються при RH2 не вище 5, а аероби - при RH2 не нижче 10.
  • бути по можливостіуніфікованим, тобто містити постійну кількість окремих інгредієнтів.

Бажано, щоб середовища були прозорими — зручніше стежити за зростанням культур, легше помітити забруднення середовища сторонніми мікроорганізмами.

  • За вихідними компонентами:
  • натуральні середовища - готують з продуктів тваринного та рослинного походження (м'ясо, асцит, кісткове борошно, кормові дріжджі, згустки крові та ін.)
  • синтетичні середовища - готують з певних хімічно чистих органічних та неорганічних сполук, взятих у точно зазначених концентраціях і розчинених у двічі дистильованій воді.
  • За рівнем готовності:
  • готові живильні середовища (у чашках Петрі, у флаконах)
  • сухі суміші
  • По консистенції (ступеня щільності):
  • рідкі (бульйони)
  • напіврідкі
  • щільні

    • Щільні та напіврідкі середовища відрізняються від рідких наявністю желюючого агента (агар-агар, рідше желатин). Крім того, як щільне середовище застосовують коагульовані яєчні або сироваткові білки, картопля, середовища з силікагелем.Деякі мікроорганізми використовують желатин як поживну речовину - при їх зростанні середовище розріджується.

    • За складом:
    • прості: м'ясопептонний бульйон (МПБ), м'ясопептонний агар (МПА), поживний желатин,
    • складні - багатокомпонентні середовища, які можуть містити амінокислоти, вітаміни, мікроелементи та інші речовини.
  • За призначенням:
  • основні - служать для культивування більшості мікроорганізмів, наприклад МПБ, МПА, бульйон, шоколадний агар,пептонна вода.
  • спеціальні - служать для виділення та вирощування мікроорганізмів, що не ростуть на простих середовищах.
  • елективні (виборчі) — служать виділення певного виду мікробів, зростання яких вони сприяють, затримуючи чи придушуючи зростання супутніх мікроорганізмів. Середовище стає елективним при додаванні до них певних антибіотиків, солей, зміни pH. Рідкі елективні середовища називають середовищаминакопичення.
  • диференційно-діагностичні - дозволяють відрізнити один вид мікробів від іншого за ферментативною активністю.
  • транспортні - призначені для первинного посіву та транспортування досліджуваного матеріалу.

    • Посуд для приготування середовищ

    Посуд для приготування середовищ не повинен містити сторонніх речовин, наприклад, лугів, що виділяються деякими сортами скла, або оксидів заліза, які можуть потрапити в середу при варінні її в іржавих каструлях. Краще користуватися скляним, емальованим або алюмінієвим посудом. Перед вживанням посуд необхідно ретельно вимити, прополоскати та висушити. Новий скляний посуд попередньо кип'ятять 30 хвилин в 1-2% розчині хлороводневої кислоти, після чого протягом години прополіскують у проточній воді.

    Вихідною сировиною для приготування більшості середовищ є продукти тваринного і рослинного походження, а також готові напівфабрикати.