БАКТЕРІАЛЬНА КОЛОНІЗАЦІЯ ІНДОМЕТАЦИН-ІНДУЦЮВАНИХ ВИРАЗОК ТОНКОГО КИШЕЧНИКА ЩУРА - Успіхи
У нормальних умовах шлунково-кишковий тракт (ЖКТ) заселений стабільними співтовариствами аутохтонних мікроорганізмів, кожен із яких займає певне місце. Якщо з якихось причин мікроорганізми зводяться від дії факторів, що регулюють їх чисельність і місце розташування, вони можуть спробувати заселити якусь не властиву для них ділянку ШКТ.
Бактеріальна колонізація кишки зазвичай починається з адгезії («прилипання») мікроба до поверхні кишкового епітелію. Нормальна структура та функція епітелію тонкого кишечника перешкоджає такій мікробній адгезії. Деструктивні зміни в стінці тонкої кишки можуть порушити механізм захисту її поверхні від адгезії бактерій, що, у свою чергу, сприятиме заселенню таких деструктивних ділянок кишечника бактеріальною флорою.
Часто деструкція кишкової стінки може розпочатися у процесі медикаментозного лікування, зокрема після застосування нестероїдних протизапальних засобів [2, 5].
Характеризується така деструкція ушкодженням слизової оболонки з розвитком ерозій, виразок та їх ускладнень у вигляді кровотеч, перфорацій та порушення прохідності ШКТ.
Експерименти на тваринах показали, що такий нестероїдний протизапальний препарат, як індометацин, може спричинити пошкодження епітелію тонкого кишечника щурів [9]. Особливо схильні до виразки в цьому випадку тонка, здухвинна і ободова кишка [3,8]. У цьому випадку в тонкому кишечнику будуть створюватися умови для появи бактеріальних колоній, подібних до тих, що описані при утворенні виразок у шлунку у щурів [7].
Метою цього дослідження було візуалізувати гістологічним методом можливу появу бактеріальних колоній на поверхні виразок тонкого кишечника щурів, спричинених дієюіндометацину.
Дослідження проводили на щурах лінії Спрег-Доулі (n = 12) масою 300-350 грам, клінічно здорових, що містилися в умовах «стандартного віварію» (регульованої тривалості «світлового дня», не схильних до стресових навантажень, збалансоване харчування і т.д.) Індометацин (Sigma, USA) у дозі 40 мг/кг ваги одноразово вводили щурам інтрагастрально обсягом 1 мл фосфатного буфера. Для подальшого морфологічного дослідження щурів забивали через 24 години після введення препарату. Після розтину черевної порожнини у щурів забирали відрізки тонкого кишечника довжиною 0,8-1,0 см і поміщали в 10% нейтральний формалін. Зафіксований матеріал заливали до парафіну. Зрізи товщиною 5-7 мкм депарафінували та фарбували гематоксилін-еозином Карраци, а також за методом Броуна-Бренна для виявлення бактерій [1].
При візуальному огляді черевної порожнини у всіх щурів, які отримували індометацин, було виявлено структурні порушення стінки тонкого кишечника у вигляді множинних виразок. Виразки починалися приблизно з середнього відділу худої кишки і продовжувалися до ілеоцекального з'єднання (рис. 1). Розташовувалися вони переважно на мезентеріальній стороні кишечника. Виразки мали розміри від 0,2 до 0,8 мм у діаметрі.
Мал. 1. Ділянка тонкого кишечника щура через 24 години після введення індометацину. Ув.25
Мікроскопічне дослідження гістологічних препаратів показало, що у сфері локалізації виразки у стінці тонкої кишки повністю відсутня слизова оболонка (мукозальний шар). У деяких щурів міг спостерігатись частковий некроз м'язового (мускулярного) шару. На мікропрепаратах, забарвлених за методом Броуна-Бренна (рис. 2) на дні виразки, можна було бачити вузьку чорну смугу - бактеріальну колонію. Колір плівки вказуєна переважання у ній грам-позитивних бактерій. Бактерії міцно утримувалися поверхні виразки, попри всі проведені процедури, пов'язані з підготовкою гістологічного мікропрепарату. Це може свідчити про те, що бактерії не просто прикріпилися і колонізували поверхню виразки, а й утворили на ній так звану біологічну плівку (біофільм) - комплексну структуру з мікробних клітин, поміщених в екстраклітинний матрикс, що складається з гідратованих полімерних субстанцій (полісахаридів, протеїнів, клітків). ). Поява такої структури як бактеріальний біофільм на різних поверхнях привернула увагу дослідників останнім часом [6]. Для неї вони відводять особливу роль у патогенезі різних запальних захворювань, таких як карієс, сечостатеві інфекції, ендокардити. Отримані результати показують, що бактеріальний біофільм може брати участь у розвитку медикаментозної виразкової хвороби.
Мал. 2. Гістологічний поперечний зріз тонкого кишечника щура через 24 години після введення індометацину: А - область утворення виразки. Темна смуга – бактеріальний біофільм на поверхні виразки; Б - інтактна ділянка. Забарвлення Броуна-Бренна. Ув.100