ФАРМАКОГНОСТИЧНА ХАРАКТЕРИСТИКА ЛИСТЬЯ КАКАЛІЇ КОП’ЄВИДНОЇ (CACALIA HASTATA L

Ірина Різдвяна 2 роки тому Переглядів:

1 ХІМІЯ РОСЛИННОЇ СИРОВИНИ З УДК ФАРМАКОГНОСТИЧНА ХАРАКТЕРИСТИКА ЛИСТЬЯ КАКАЛІЇ КОП'ЄВИДНОЇ (CACALIA HASTATA L.) Д.М. Оленніков*, О.Г. Потаніна, Л.М. Танхаєва, Г.Г. Ніколаєва Інститут загальної та експериментальної біології СО РАН, Улан-Уде (Україна), Проведено фармакогностичний аналіз листя какалії списоподібної (Cacalia hastata), в ході якого виявлено діагностичні ознаки сировини. Встановлено, що до складу листя Cacalia hastata входять різні групи БАВ: органічні кислоти (до 13%), каротиноїди (до 314 мг%), хлорофіли, вуглеводи, фенолокислоти, флавоноїди, дубильні речовини, кумарини, алкалоїди, тритерпени, вітаміни. Для стандартизації листя Cacalia hastata визначено діючі речовини, для яких розроблено методики якісного та кількісного визначення (органічні кислоти та каротиноїди). У ході товарознавчого аналізу розроблено числові показники сировини. Введення Рід Какалія Cacalia L. сімейство Астрові Asteraceae Dumort. містить близько 50 видів [1]. В Україні та країнах СНД цей рід представлений трьома рядами та поєднує шість видів [2]. Назва «Cacalia» взято у Діоскоріда; тривіальна назва недостигла, гусяча лапка, тибетське "ю-гу-шинг", японське "yobusumaso" або "inudona", китайське "shānjiānzi", німецьке "kakalia", англійське "cacalia", фінське "keihäsnauhus", мексиканське "maturing". Cacalia hastata (какалія списоподібна) багаторічна кореневищна трав'яниста рослина висотою до 190 см, широко поширена в Україні; там зустрічається північ від Монголії, північному сході Китаю, Кореї, Японії, Північної Америки. C. hastata зустрічається в розріджених хвойних абодрібнолисті ліси, зрідка в борах; по узліссях змішаних лісів, у кам'яноберезниках і чагарниках вільховника та кедрового стланика; на Далекому Сході також у дубових лісах, у чагарникових чагарниках, на лісових і прирічкових луках, у горах, по річкових долинах у лісовому поясі, місцями піднімається на нижній частині альпійського пояса [3, 4]. У корінні C. hastata виявлено алкалоїди (хастацин) [5, 6]; сесквітерпени: какалохастин, дегідрокакалохастин, какалол, какалола ацетат, какалола сенеціоілат, какалонол, 6-метоксикакалонол, пероксикакалонол, какалолід, матуринон, тетрагідроматуринон, О-метилкакалоєн, 6β-пропіон, 6β-пропіон гідрофукінон, баккенолід А [7 11]; кавова кислота, етилкофеат, кофеїл-1-β-d-глюкопіранозид [10]. Хімічний склад листя досліджено недостатньо. У них виявлені флавоноїди [12], дубильні речовини [13], аскорбінова кислота, каротин, винна кислота та тартрат кальцію [14]. На підставі аналізу даних літератури можна зробити висновок, що для листя Cacalia hastata відсутні відомості про поглиблені дослідження біологічно активних речовин і існує необхідність у проведенні розширеного хімічного вивчення цієї рослини. У практиці медицини Тибету в Забайкаллі при гнійних ранах, виразках в якості ранозагоювального, антиексудативного, гемостатичного засобу, а також при бронхітах застосовувалися тільки листя * Автор, з яким слід вести листування.

2 44 Д.М. ОЛЕННИКОВ, О.Г. ПОТАНІНА, Л.М. ТАНХАЄВА, Г.Г. МИКОЛАЄВА C. hastata, відомі під назвою «ю-гу-шинг» [1517], тому в завдання наших досліджень входило вивчення тільки цієї частини рослини. В Інституті загальної та експериментальної біології СО РАН (Улан-Уде) розроблено спосіб отримання сухого екстракту з листя какалії списоподібної, для якоговстановлена виражена кардіопротекторна активність [18]. Відповідно до вимог нормативної документації на лікарську сировину джерела одержання сухого екстракту, у цій роботі наведено результати визначення числових показників товарознавчого аналізу, морфолого-анатомічних ознак, якісного та кількісного складу біологічно активних речовин (БАВ) листя. Експериментальна частина. Загальні експериментальні умови. Для проведення товарознавчого аналізу використовували сировину листя C. hastata, зібрані в трьох районах республіки Бурятія (Прибайкальський, Мухоршибірський, Заграєвський) у період з 1998 по 2002 р. Аналіз проводився в 5 паралельних дослідах для цільного, подрібненого та порошкованого видів сировини. Відбір проб та проведення аналізу проводили відповідно до вимог ГФ XI [19]. Маса середньої проби становила 400 г. Зовнішні відмітні ознаки встановлювалися для цільної, подрібненої та порошкованої сировини листя C. hastata. Аналіз зразків проводили шляхом візуального огляду, за допомогою лупи та бінокуляра. Аналізуючи цільну рослинну сировину, готували мікропрепарати листа та черешка з поверхні, поперечні зрізи листа та черешка, використовуючи аналітичну пробу для визначення справжності, подрібненості та вмісту домішок. Мікропрепарати готували за стандартними методиками [19, 20]. Для аналізу рослинної сировини вибирали з аналітичної проби для визначення справжності, подрібненості та вмісту домішок великі шматочки листка та черешка. Готували мікропрепарати аналогічно мікропрепаратам із цільної сировини. З частини, що залишилася взятої на аналіз проби відсівали фракцію великого порошку через сито з отворами діаметром 2 мм. Готували мікропрепарати за методикою виготовлення мікропрепаратів порошку [19, 20]. Готові препаратививчали під мікроскопом МБІ-3 (збільшення 7 1,5 10; 7 1,5 20; 15 1,5 10; 15 1,5 20). Результати документували мікрофотографіями за допомогою фотоапарата «Зеніт» та мікрофотонасадки МФН-12. Якісний аналіз проводили з використанням загальноприйнятих методик [21, 22]. Кількісний аналіз проводили із застосуванням наступних методик: хлорофіли спектрометрична [22], вуглеводи гравіметрична [23], хроматоспектрофотометрическая фенолокислоти [24, 25]; дубильні речовини трилонометрична [26], алкалоїди гравіметрична [6], тритерпенові сполуки спектрофотометрична [27], вітаміни В хроматоспектрофотометрична [6], кремній спектрофотометрична [28]. Для органічних кислот, каротиноїдів та аскорбінової кислоти розроблено методики кількісного визначення. Методика визначення сумарного вмісту органічних кислот у перерахуванні на яблучну кислоту. Аналітичну пробу сировини подрібнюють до розміру частинок, що проходять через сито з отворами діаметром 0,5 мм. Близько 5,0 г (точна навішування) подрібненої сировини поміщають у конічну плоскодонну колбу місткістю 250 мл з притертою пробкою, додають 100 мл очищеної води, нагрівають вміст колби на водяній бані до 70 С і підтримують цю температуру протягом години. Після охолодження витяг фільтрують у мірну колбу місткістю 200 мл (V 1 ) через паперовий фільтр, який промивають 10 мл очищеної води і доводять об'єм розчину до мітки тим же розчинником (розчин А). 10 мл (V 2 ) розчину пропускають через іонообмінну колонку, яку промивають 50 мл води. Елюат та промивні води переносять у склянку для потенціометричного титрування. Титрування проводять 0,1 н розчином NaOH до значення pH 7,0. Титр розчину NaOH встановлюють гідрофталатом калію. Зміст суми органічних кислот (Х) ввідсотках у перерахунку на яблучну кислоту та абсолютно сухій сировині розраховують за формулою:

4 46 Д.М. ОЛЕННИКОВ, О.Г. ПОТАНІНА, Л.М. ТАНХАЄВА, Г.Г. МИКОЛАЄВА Обговорення результатів Зовнішні ознаки листя Cacalia hastate. Цілісна сировина. Суміш цілісного або частково подрібненого листя. Листя ширококоп'єподібне або широколанцетоподібне, по краю рівномірно дрібнозубчасті або виїмчасто-зубчасті, з верхньої сторони голі, з нижньої голі або слабо волосисто-опушені (оксамитові); черешки циліндричні. У місці обриву черешка видно залишки світлих жилок. Довжина листа з черешком см, ширина див. Колір зелений. Запах характерний слабкий. Смак гірко-кислий, терпкий. Подрібнена сировина. Шматочки листя різної форми, що проходять крізь сито з діаметром отворів 7 мм. Колір зелений. Запах характерний слабкий. Смак водного вилучення гірко-кислий, терпкий. Порошкована сировина. Розтерту сировину, що проходить крізь сито з діаметром отворів 2,0 мм. Колір зелений. Запах характерний слабкий. Смак водного вилучення гірко-кислий, терпкий. Мікроскопічне дослідження листя Cacalia hastate. Цілісна сировина. При розгляді листа какалії списоподібної з поверхні виявляються клітини епідермісу з верхньої сторони листка зі стінками від слабовивистих (під підставою листа і поблизу жилок) до сильно звивистих (довжиною мкм, шириною мкм); з нижньої сторони клітини з сильно звивистими стінками (довжиною мкм, шириною мкм). Продихання оточені 4 8 околоустьичними клітинами (аномоцитного типу), овальні, що виступають над поверхнею листа (довжиною мкм, шириною мкм), зустрічаються з нижнього боку листа з частотою народження на 1 мм 2 (з верхньої сторони відсутні). Над жилками клітини епідермісу витягнуті прямокутноверетеноподібної форми з прямими та слабозвивистими стінками. Кутикула протягом усієїпластинки листа рівна, по краю листа і вздовж жилок поздовжньо-зморшкувата. З нижньої сторони листа можуть спостерігатися прості багатоклітинні (що містять до 12 клітин) тупоконусовидні тонкостінні волоски з гладкою поверхнею, з вузькою кінцевою клітиною (довжиною від 100 і понад 1000 мкм), нерідко стінки клітин волосків спадаються (рис.1а, 1Б). Найчастіше волоски зустрічаються вздовж жилок. Частота народження волосків у різних аналізованих зразках листя різна деякі з них мають голу поверхню, деякі слабо-опушеную, інші більш виражену опушеність (з частотою народження від 35 до 157 волосків на 1 мм 2 ). По краю листа і жилкам з верхньої та нижньої сторони листа спостерігаються прості багатоклітинні товстостінні тупоконусовидні волоски (рис. 1В), деякі з них з багатоклітинними основами. В основі волоска і протягом 1 2 нижніх його клітин кутикула поздовжньо-зморшкувата. Товстостінні волоски мають більш короткі клітини, ніж тонкостінні. Товстостінні волоски спостерігаються у всіх зразках, навіть у тих, у яких відсутні тонкостінні волоски. В основі деяких волосків клітини епідермісу утворюють розетки. Волоски нерідко обламуються, залишаючи місця свого прикріплення з початковою клітиною волоска, що має поздовжньо-зморшкувату кутикулу. По краю листа можуть зустрічатися сосочкоподібні невисокі плоскі вирости зі зморшкуватою кутикулою (рис. 6). Уздовж жилок виявляються невеликі тяжі з секретом (рис. 1), судном III, що не фарбується, (відсутні жирне, ефірне масло) і метиленовим синім (відсутні слизу), крім того, крізь епідерміс у мезофілі рясно просвічують невеликі крапельки секреторного характеру. , що також не реагують на зазначені реактиви. Аркуш дорсовентральної будови (рис.1г). Мезофіл складається зодного двох рядів палісадної паренхіми і трьох-семи рядів губчастої паренхіми, що складається з клітин округлої та округло-лопатевої форми, що утворюють аеренхіму, що характерно просвічує крізь епідерміс, при розгляді листа з поверхні. Жилка представлена одним або декількома закритими колатеральними пучками; з боку флоеми та ксилеми розташовується кутова коленхіма. Під епідермісом в області жилки з верхньої та нижньої сторони листа спостерігається кутова коленхіма (залежно від товщини жилки: 1 4 ряди з верхньої сторони; 0 2 ряди з нижньої). Епідерміс черешка представлений витягнутими клітинами (довжиною мкм, шириною мкм) майже прямокутної та прямокутно-веретеноподібної форми з рівними стінками. Кутикула поздовжньо-зморшкувата. Продихання такі ж, як на поверхні листа (довжиною мкм, шириною мкм), зустрічаються з частотою 0 87 на 1 мм 2. Рідко спостерігаються прості тупоконусовидні багатоклітинні товстостінні волоски. Протягом 1 2 нижніх клітин волоска кутикула поздовжньо-зморшкувата. Волоски нерідко обламуються, залишаючи місця свого прикріплення з початковою клітиною волоска. Структура прилеглих по обидва боки черешка вузьких смуг листової пластинки аналогічна структурі листа. На поперечному зрізі

5 ФАРМАКОГНОСТИЧНА ХАРАКТЕРИСТИКА 47 черешка видно кілька пучків, що проводять, більше десяти. Провідні пучки різної будови: колатеральні закриті, відкриті та з частково вираженим камбієм; а також концентричні з флоемою у центрі пучка (амфівазальні) (рис. 1Д). Деякі пучки поєднуються в групи, утворюючи ланцюжки пучків. У колатеральних пучках з боку флоеми та ксилеми розташовується кутова коленхіма, у деяких пучках відсутня. Під епідермісом по всьому колу черешка розташовані 14 ряди кутової коленхіми. Подрібненесировину. Спостерігаються анатомічні ознаки аналогічні ознакам цільної сировини. А Б В Г Д Мал. 1. Фрагменти анатомічної будови листа какали списоподібної. А Б прості багатоклітинні тонкостінні волоски на нижній епідермі листа (ув. 100); У прості багатоклітинні товстостінні волоски по краю листа (ув. 200); Г фрагмент поперечного зрізу листа (ув. 250); Д фрагмент поперечного зрізу черешка (ст. 200).