Хламідія - діагностика та лікування

Урогенітальні хламідіози в даний час є поширеними захворюваннями і являють собою реальну загрозу здоров'ю чоловіків, жінок і дітей.

В даний час з хламідіями пов'язують захворювання сечостатевого апарату, очей, суглобів, респіраторні ураження та ряд системних проявів. Наукові дослідження та багаторічні клінічні спостереження показують, що вони можуть зумовлювати безплідність, спричинити патологію вагітності, хвороби новонароджених та дітей раннього віку. Дослідження останніх років довели внутрішньоутробне інфікування хламідіями плода.

За даними літератури, хламідіозом уражено від 30 до 60% жінок і до 50% чоловіків, які страждають на запальні захворювання сечостатевих органів. Необхідно враховувати, що за медичною допомогою звертаються лише пацієнти з вираженими клінічними проявами хламідійної інфекції, і слід вважати, що кількість хворих, включаючи хламідійне носійство, значно більша. Хламідійна інфекція поширена також серед вагітних, новонароджених та дітей раннього віку. У зв'язку зі збільшенням кількості хворих на урогенітальний хламідіоз виникає питання: чи є зростання хламідійної інфекції результатом її почастішання або посилення уваги до цієї проблеми і, отже, поліпшення діагностики. В Україні на хламідійну інфекцію страждає майже третина чоловіків і жінок репродуктивного віку. Необхідно враховувати, що хламідіоз найчастіше протікає без вираженої симптоматики, важко діагностується, непросто виліковується та здатний давати масу ускладнень.

Причиною урогенітальних хламідіозів є хламідії – грамнегативні бактерії. Їх ділять на два види - Chlamydia trachomatis, що включають родинні мікроорганізми, що первинно вражають ссавців та птахів. Разом вониутворюють рід Chlamydia, представники якого мають бактеріоподібні морфологічні характеристики та унікальний цикл розвитку. Хламідійна урогенітальна інфекція відноситься до групи збудників ПЛТ (псіттакоза-орнітоза-лімфогранульоми-трахоми). Збудником сечостатевих хламідіозів є Chlamydia trachomatis серотипів D-K.

Цервіцит, уретрит, вагініт, ендометрит, сальпінгіт, перигепатит.

Уретрит, епідидиміт, простатит

Кон'юнктивіт, артрит, хвороба Рейтера

Хламідії – облігатні внутрішньоклітинні паразити. Спочатку їх відносили до великих вірусів. Хламідії мають РНК, ДНК, мають клітинну стінку та рибосоми, подібні до рибосом грамнегативних бактерій, їх зростання пригнічують антибіотики. Розмножуються тільки всередині клітин організму господаря, маючи виражений тропізм до циліндричного епітелію слизових шлунково-кишкового тракту, верхніх дихальних шляхів, урогенітального тракту.

Особливості розмноження мікроорганізму визначають:

Триваліший, ніж при інших статевих інфекціях, латентний період між моментом інфікування та появою симптоматики

Непомітний початок і безсимптомний перебіг захворювання, оскільки ознаки запалення розвиваються повільно.

Необхідність проведення тривалого курсу лікування, що захоплює 7-8 циклів внутрішньоклітинного розмноження збудника.

Основними формами хламідій є елементарні та ретикулярні тільця. Елементарні тільця, які є інфекційними формами мікроорганізму, відповідальні за процес прикріплення до клітини-мішені та проникнення до неї. Маленькі та щільні елементарні тільця мають ригідну клітинну стінку, укріплену міцними дисульфідними зв'язками основного білка зовнішньої мембрани (МОМР) та двомабагатими цистеїном білками: структурну цілісність елементарних тілець підтверджує їх стійкість до факторів навколишнього середовища, що дозволяє виживати після лізису клітини-господаря та в період подальшого переходу від клітини до клітини, а також від одного господаря до іншого. На противагу цьому, ретикулярні тільця - це метаболічно активні форми мікроорганізму, що синтезують ДНК, РНК та білки. Елементарні та ретикулярні тільця, які є різними формами хламідій, еволюційно є результатом адаптації до позаклітинного та внутрішньоклітинного середовища відповідно.

Цикл розвитку хламідій починається після прикріплення елементарних тілець до чутливої клітини, за яким слідує проникнення організму в везикули фагоцитів. Подібно до багатьох облігатних внутрішньоклітинних паразитів, хламідії здатні змінювати нормальні захисні механізми клітини-господаря. Хламідії мають облігатний внутрішньоклітинний життєвий цикл, успішно долаючи перешкоди для проникнення в клітину господаря, існування та розмноження в ній, а також виживання в період переходу з клітини в навколоклітинне середовище. Вважається, що велику роль у розвитку захворювання при хламідійній інфекції відіграють імунні процеси. Персистирующие хламідійні інфекції були змодельовані в деяких короткоживучих клітинних системах. Ці моделі дозволили виявити відхилення в циклі розвитку хламідій, що виражаються в тому, що життєздатні організми залишалися в непродуктивній стадії ростового циклу. «Персистенція» має на увазі довготривалу асоціацію хламідій із клітиною-господарем. Вони перебувають у ній у життєздатному стані, але культурально не виявляються. Термін «персистентна інфекція» означає відсутність явного зростання хламідій, припускаючи їх існування у зміненому стані, відмінномувід їх типових внутрішньоклітинних морфологічних форм

Хіміотерапевтичні препарати, що мають антихламідійну активність, здатні не тільки інгібувати розмноження та викликати загибель хламідій. Деякі з них, які тривалий час використовуються в серії послідовних пасажів у малих дозах, можуть давати і протилежний ефект, індукувати утворення резистентних мутантів. Відомо виникнення подібних мутантів, резистентних до пеніциліну або тетрацикліну,

Хламідіям властива висока лабільність, що виявляється при дії багатьох фізичних та хімічних факторів. Ці мікроорганізми виявляють виражену чутливість до дії короткохвильових та довгохвильових ультрафіолетових променів та високої температури. Позаклітинні хламідії втрачають інфекційність протягом 24-36 год при 35-37 ° С. Ця температура відповідає їх найбільшій метаболічній активності в період розмноження в клітині господаря.

Епідеміологія

Chlamydia trachomatis викликає 60% випадків негонококових уретритів

Число безсимптомних випадків інфекції, що викликаються Chlamydia trachomatis, у молодих чоловіків та жінок досягає від 5 до 20%.

У 15-30% жінок з хламідійною інфекцією шийки матки розвиваються запальні захворювання органів малого тазу (ВЗОМТ).

Chlamydia trachomatis є найчастішою причиною епідидиміту у чоловіків молодше 35 років, що призводить до значної захворюваності та втрати працездатності.

Діагностика

виділення збудника у культурі клітин

метод полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР)

пряма або непряма імунофлуоресценція (ПІФ)

Виділення хламідії у культурі клітин є традиційним методомдіагностики Цей метод має 100% специфічність і є «золотим стандартом» і стандартом для C. Trachomatis. Однак його використання обмежене у зв'язку з надзвичайно високою трудомісткістю, дорожнечею, хибнонегативними результатами.

Виявлення цитоплазматичного включення хламідії в епітеліальних клітинах препаратів, пофарбованих за методом Романовського-Гімзи, є класичним методом діагностики. Цитоплазматичні включення є компактні або рихло розташовані зернисті маси, що містять морфологічні структури збудника на різних етапах його розмноження. Вони часто визначаються поблизу ядра, нерідко зміщують його до периферії клітини, мають різноманітну форму, відрізняючись від ядра та цитоплазми. Дрібні, ранні включення, що містять великі тільця, мають синьо-фіолетове забарвлення, великі включення з переважно дрібними зрілими структурами збудника -рожево-червоне. Метод має низьку чутливість, дозволяє діагностувати близько 10% випадків хламідійної інфекції, та й то за досить високої кваліфікації лаборанта та за великої трудомісткості.

Для серодиагностики використовують методику – РСК (реакція зв'язування комплементу) та серодиагностику з родоспецифічним антигеном (загальним для C. trachomatis та psittaci). Серологічні методи прості у виконанні, проте, дають великий відсоток хибнопозитивних результатів, зумовлених перенесеною в минулому хламідійною інфекцією. Для підтвердження хламідійної інфекції необхідно використовувати додаткові методи або проводити повторні серологічні дослідження для спостереження за титром реакції. РЗК дозволяє визначити тільки групові антигени, малочутлива і у хворих на хламідійні уретрити дає не більше 15% позитивних результатів. Серологічні методи можутьбути корисними при ускладнених або хронічних інфекціях, а також як методи скринінгу великих груп населення з подальшим відбором осіб для подальшого обстеження.

Діагностика за допомогою імуноферментного аналізу (ІФА) заснована на уловлюванні зміни кольору субстрату спектрофотометром. Переваги ІФА полягає у простоті транспортування та зберігання отриманих матеріалів, об'єктивності оцінки результатів, можливості автоматизації та одночасного дослідження безлічі проб. Його недоліком є неможливість виключення хибнопозитивної реакції, складність контролю якості досліджень, менша чутливість і специфічність методу, ніж реакція прямої імунофлюоресценції з моноклональними антитілами.

Метод полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) та його варіанти виявляють інфекцію за декількома молекулами ДНК. Метод застосовується для дослідження цервікальних, уретральних мазків, сперми, осаду сечі. Однак широке впровадження ПЛР як діагностичний метод здатне призвести до гіпердіагностики хламідіозу.

Імунофлуоресцентний метод - пряма імунофлуоресценція (ПІФ) з використанням моноклональних антитіл проти основного білка зовнішньої мембрани (МОМР) Chlamydia trachomatis - є в даний час основним методом у всьому світі. З використанням ПІФ вперше стало можливим швидко та точно виявляти хламідійну інфекцію у досліджуваному матеріалі (30-50 хвилин). ПІФ включає використання мічених флуоресцеїном моноканальних антитіл як до ліпополісахариду, так і до основного білка зовнішньої мембрани (МОМР) хламідій. Фіксований за допомогою ацетону, на предметному склі мазок обробляється флуоресцентними антитілами до хламідій з одночасним створенням контрасту синькою Еванса, відмивається протягом години фосфатним буфером на магнітніймішалці. На препарат наносять краплю забуференого гліцерину, накривають покривним склом та мікроскопують у люмінесцентному мікроскопі, використовуючи іммерсійний об'єктив. Позитивну відповідь дають при виявленні не менше 5 елементарних тілець або типового цитоплазматичного включення. Якщо в препараті клітин епітелію не виявлено, слід вважати, що матеріал було взято неправильно. Метод ПІФ високочутливий, специфічний, простий у виконанні. Недоліком методу є те, що виявлення зовнішньої мембрани хламідій ще не є доказом наявності життєздатного організму. Це слід враховувати при встановленні лікування від хламідіозу.