Метод аглютинації в сольовому середовищі - Дослідження антигенів та антитіл крові -
Для визначення резус-приладдя в сольовому середовищі необхідні стандартні сироватки, що містять повні антирезус сольові антитіла. Нині цим методом користуються переважно спеціалізовані резус-лабораторії.
Визначення резус-належності сольовим методом проводиться у пробірках висотою 20-25 мм, діаметром 5-6 мм. Робоче місце оснащується так само, як і для дослідження резус-приналежності шляхом конглютинації. Інкубація досліджуваної крові із сироватками антирезус проводиться в термостаті при температурі 37°. Для обліку результатів реакції необхідно мати лупу з шести - восьмикратним збільшенням.
Кров для дослідження може бути взята як із консервантом, так і без нього. В обох випадках її доцільно відмити у фізіологічному розчині. З відмитих еритроцитів готується 2% завись у фізіологічному розчині.
Для цього одна крапля еритроцитів, що осіли на дні пробірки після відмивання, вноситься в пробірку, що містить 49 крапель фізіологічного розчину. Всі пробірки, в яких готується 2% завись еритроцитів для дослідження, відповідно маркуються.
Звичайний штатив, призначений для лабораторних пробірок, накривається листом білого паперу, на якому розколюються отвори. У штатив встановлюються два ряди пробірок по одній парі для кожного досліджуваного зразка крові, по дві пари для резус-позитивних та резус-негативних контрольних еритроцитів. Проти кожної пари пробірок на аркуші паперу написуються прізвище та ініціали особи, що обстежується.
У всі пробірки першого ряду вноситься по дві краплі сироватки антирезус однієї серії, пробірки другого ряду - по дві краплі сироватки антирезус іншої серії. Сироватка антирезус повинна бути попередньо розведена таким жекількістю фізіологічного розчину хлористого натрію
Відповідно позначені пари пробірок вноситься по одній краплі досліджуваних еритроцитів, в контрольні пробірки - така ж кількість резус-позитивних і резус-негативних стандартних еритроцитів. Вміст пробірок ретельно перемішується шляхом струшування, штатив поміщається в термостат на 1 годину при температурі 37°.
Результати враховуються шляхом перегляду пробірок, розміщених над джерелом розсіяного світла, по поздовжній осі за допомогою шести-восьмиразової лупи.
Реакція визначається за наявністю чи відсутністю аглютинації, про що свідчить форма осаду еритроцитів на дні пробірки.
При позитивному результаті осад розташовується на дні пробірки нерівним шаром губчастим. Краї осаду нерівні, найчастіше вигнуті і загорнуті всередину. В окремих випадках еритроцити можуть розміщуватися у вигляді хвилястого віночка навколо світлішої центральної частини осаду. При негативному результаті шар осаду рівномірний із невеликими розгалуженнями в центрі.
«Організаційно-практичні питання служби крові», Л.В.Іванов