Послідовних етапів розвитку зародка курки
Препарат 1. Тотальний препарат зародка курки. Стадія утворення первинної смужки та гензенівського вузлика (16-19 годин інкубації). Забарвлення гематоксиліном (рис. 19).
При малому збільшенні мікроскопа на тотальному препараті видно зародковий диск, який має форму еліпса з ширшою головною частиною. У зародковому диску виявляються дві зони – центральна світла (arеа реllіcidа)іпериферична темніша(аrеа ораса). , затемнені області вarеа реllіcidа -скупчення клітин, які мігрують в область первинної смужки.
Уздовж довгої осі зародкового щитка по середній лінії тягнеться первинна смужка. На передньому кінці первинної смужки можна розрізнити гензенівський вузлик у вигляді темнішої плями.
На стадії 18-19 год інкубації первинна смужка зародків набуває поздовжнього поглиблення по середній лінії з валиками по краях, а також заглиблення в передній її частині - ямка гензеновського вузлика. Первинна борозенка та ямка гензенівського вузлика утворюються в результаті міграції клітин епібласту у простір між майбутніми ектодермою та ентодермою. Так формується мезодерма. Закладка мезодерми просвічує як бічних тіней біля первинної смужки.
На той час починається імміграція клітин гензенівського вузлика під епібласт, підвертаючись через гензенівську ямку – це клітини хорди, ентобласта і мезобласта. Ці клітини рухаються в бластоцелі вперед від гензеневського вузлика, утворюючи хордальний тяж, кишкову ентодерму (заміщаючи собою гіпобласт у передньому відділі зародка) та головну мезодерму.
З цього моменту починається регресія первинної борозенки. Вона починає коротшати в передньо-задньому напрямку, і гензенівський вузлик починаєзміщуватися з центру світлої зони до її заднього краю, залишаючи на своєму шляху клітини, що нарощують позаду хордальний виріст.
На тотальному препараті зародка цієї стадії видно хордальний виріст з невиразними обрисами, розташований спереду гензенівського вузлика. Потімні області праворуч і ліворуч від нього - скупчення клітин головної мезодерми. Затемнені області справа і зліва від первинної смужки - скупчення мезодермальних клітин, що виселяються (осьова і бічна мезодерми зародка, а також позазародкова мезодерма).
Мал. 19. Зародок курки на стадії 16 годин інкубації. Формування первинної смужки та гензенівського вузлика. Тотальний препарат. Вид зверху на щиток зародка. Окр. гематоксиліном та еозином.
Препарат №2. Тотальний препарат зародка курки. Стадія нейруляції (22-28 годин інкубації). Забарвлення гематоксиліном (рис. 20).
У період 22-28 годин інкубації у зародка курки відбувається процес нейруляції.
Процес формування нейральних структур у птахів та інших класів хребетних багато в чому подібний. Докладніше цей процес було розглянуто з прикладу нейруляції у амфібій.
Приступаючи до вивчення будови зародка на стадії нейрули, слід звернути увагу, що диференціювання зародкових листків у головному відділі зародка значно випереджає диференціювання в тулубному і хвостовому відділах. Так, змикання нервових валиків починається з головного відділу, а потім поширюється у задньому напрямку. Також відбувається сегментація осьової мезодерми при утворенні сомітів. З головного відділу починається відокремлення зародка від жовтка. Це явище називаютькраніокаудальним градієнтом розвитку.Він характерний для ембріонів всіх класів хребетних тварин, у птахів виражений особливо яскраво, так якперіод гаструляції та нейруляції тіло ембріона суттєво зростає за рахунок постійного надходження мезодермальних клітин з первинної борозенки та його розміри по краніокаудальній осі на порядок перевищує поперечні розміри. На препаратах пізньої нейрули курки видно, що в хвостовій ділянці зародкового диска є ділянка, на якій ще завершується гаструляція. У центральній частині зародкового диска добре помітні структури, характерні для ранньої (нервова пластинка) та середньої (нервові валики) нейрули.
Процес нейруляції відбувається досить швидко, тому, залежно від часу забору матеріалу від початку інкубації, можна побачити ряд особливостей в освіті зародкових структур.
Рання нейрула (23-24 год інкубації). На ранніх етапах нейруляції слід звернути увагу на початок відділення головного відділу зародка від стінки жовткового мішка за допомогою
Мал. 20. Зародок курки на стадії 27 годин інкубації. Формування осьових органів. Тотальний препарат. Вид зверху на щиток зародка. Окр. гематоксиліном та еозином.
головної складки. На тотальних препаратах зародків стадії ранньої нейрули ця складка представлена серповидною смужкою спереду від нервових валиків, що утворюються на той час у головному відділі зародка. На цій стадії розвитку починається сегментація осьової мезодерми: на препаратах добре видно першу пару сомітів.
Середня нейрула (24-26 год інкубації). На тотальних препаратах стадії середньої нейрули слід розглянути край головної складки, розташованої під головою зародка. Це місце називаєтьсяобластю передніх кишкових воріт,так як тут розташований вхід у головну кишку зародка. На цій стадії в тілі зародка є 4 - 5 пар сомітів, в задній області ареаораса з'являються кров'яні острівці, продовжують стулятися нервові валики, утворюючи нервову трубку. Добре видноневропори -відкриті входи спереду і ззаду, що ведуть в порожнину нервової трубки -невроцель.
Пізня нейрула (26-28 год інкубації). У зародків стадії пізньої нейрули передній відділ нервової трубки розширений, є 6 - 8 пар сомітів, починають об'єднуватися парні зачатки серця, продовжують стулятися нервові валики.На цій стадії розвитку особливо добре помітний краніокаудальний градієнт у розвитку. Каудальні заднього невропора добре видно нервові валики і нейральна пластинка. У самій задній частиніarеа реllіcidавсе ще триває процес нейруляції. Тут добре помітні хордальний виріст, гензенівський вузлик і залишок первинної смужки.
Препарат №3. Тотальний препарат зародка курки. Стадія утворення мозкових пухирів (33-40 годин інкубації). Забарвлення гематоксиліном (рис. 21).
Стадія трьох мозкових пухирів (30-33 год інкубації). На стадії трьох мозкових бульбашок передній невропор замикається. Головна частина нервової трубки слабкими поперечними перетяжками підрозділена три мозкові міхура: первинний передній мозковий міхур, середній мозковий міхур, первинний задній мозковий міхур. При цьому задній мозковий міхур без видимих меж переходить у зачаток спинного мозку. Передній мозковий міхур - найбільший, його бічні стінки є зачатками нейральних частин ока (сітківки, райдужної оболонки та пігментного епітелію) Задній невропор знаходиться на рівні сформованих сомітів.
Головна складка знаходиться приблизно на рівні середнього відділу головного мозку, а передні кишкові ворота — каудальніші за задній мозковий міхур або на рівні кордону між головним і спинним мозком. Парні зачаткисерця на рівні передніх кишкових воріт об'єднуються, утворюючи спільну судину (трубку), яка згинається у правий бік.
На тотальних препаратах ембріона курки цієї стадії розвитку передні кишкові ворота візуально накладаються на закладку серця, що формується. Закладка серця лежить вентральніше кишки зародка.
Осьова мезодерма утворює приблизно 7-10 пар сомітів, при цьому перша пара сомітів розсіюється.
На цьому препараті, як і на тотальних препаратах стадії нейруляції, добре помітний краніокаудальний градієнт розвитку. Видима морфологічна картина у задній частині тіла зародка відповідає нейруляції, але в ранній стадії трьох мозкових міхурів у самій каудальної частини можна розрізнити і структуру гензеновского вузлика.
Стадія п'яти мозкових пухирів (35-40 год інкубації). На стадії п'яти мозкових бульбашок передній міхур перетворюється на два шляхом невеликого випинання своєї передньої стінки. Це передній мозок – зачаток великих півкуль. Основна маса клітин переднього міхура утворює другий мозковий міхур - зачаток проміжного мозку. Середній мозковий міхур залишається без видимих змін і є зачатком середнього мозку. Задній мозковий міхур шляхом поперечної перетяжки поділяється на два: четвертий мозковий міхур - зачаток мозочка і вартолієва моста і п'ятий мозковий міхур - зачаток довгастого мозку. На рівні середнього мозкового міхура намічається перший згинання зачатка мозку, спрямований у бік жовтка.
В області проміжного мозку чітко видно бічні випинання – очні бульбашки. Вони пов'язані з мозком тонкими
Мал. 21. Зародок курки на стадії 36 годин інкубації. Формування п'яти мозкових пухирів. Тотальний препарат. Вид зверху на щиток зародка. Окр. гематоксиліном та еозином.
«очними стеблами». Очні бульбашки підростають до покривної ектодерма.
В ектодермі над заднім мозком утворилися два поглиблення – слухові ямки, зачатки органу слуху.
Середня частина серцевої трубки – зачатка серця – випинається вправо і добре видно збоку від головного мозку, це майбутня шлуночкова частина серця. По краю розташована добре сформована мережа кров'яних острівців. Осьова мезодерма утворює приблизно 12-16 пар сомітів.
Головна частина тулубної складки знаходиться на рівні задніх відділів головного мозку, а передні кишкові ворота – на рівні межі головного та спинного мозку. Передні кишкові ворота на цій стадії розвитку знаходяться на рівні відходження від закладення серця жовткових вен і накладаються на каудальну стінку синуса венозного.
На цій стадії розвитку починає формуватись головна складка амніону. На тотальному препараті вона спочатку видно як півмісяць спереду від тіла зародка, темніший, ніж його структури зародкового диска. Наприкінці стадії п'яти мозкових бульбашок, перед початком повороту, головна складка амніону приховує всю область переднього мозку. Починається формування задньої та бічних частин тулубової складки.
Препарат № 4. Тотальний препарат зародка курки. Стадія повороту (48-56 год інкубації). Забарвлення гематоксиліном (рис. 22).
Тотальний препарат ембріона курки цієї стадії має товщину більше 1 мм.
Головний мозок вигнутий і видно його частина, що виступає вперед -середній мозковий міхур.
Поворот починається в краніальній ділянці та поширюється в каутальному напрямку. Наприкінці другої доби інкубації починається утворення першого мозкового вигину в області середнього мозку. Що лежать попереду ньогопроміжний і передній відділи мозку, починають повертатися під кутом 90° по відношенню до позаду заднього і довгастого мозку, що лежать, у бік жовтка. Одночасно всі відділи мозку, розвиваючись кожен у своєму напрямку, виявляють тенденцію до повороту на ліву сторону по відношенню до жовтка. Таким чином, вся передня частина зародка разом із зачатком мозку повертатиметься на лівий бік. Цьому сприяють те, що сталося, раніше утворення головної кишки та її відділення від стінки жовткового мішка за допомогою тулубної складки.
На третю добу інкубації передня частина зародка повертається ліворуч. У цей час можна спостерігати подальший розвиток всіх органів, що заклалися раніше. Відбувається утворення задньої частини тулубної складки, формуються хвостова нирка та задня кишка зародка.
Пізніше, після завершення повороту, ембріон повністю відокремлюється від жовтка і приймає С-подібну форму, характерну для ембріонів усіх амніот.
Передня частина зародка зовні покрита амніотичною та серозною оболонками, які утворилися при змиканні амніотичних складок. Край складок видно лише на рівні 15-17 пар сомітів.
На той час відбувається повний розвиток жовткових кровоносних судин. Первинна смужка представлена лише щільним скупченням клітин біля каудального кінця зародка.
Мал. 22. Зародок курки на стадії 48 годин інкубації. Формування внутрішніх органів зародка та кишки. У стінці жовткового мішка утворюються численні кровоносні судини. Тотальний препарат. Вид зверху на щиток зародка. Окр. гематоксиліном та еозином.