Приготування пропаратів для мікроскопії
| Мікробіологія: методи Правила роботи в мікробіологічній лабораторії Приготування пропаратів для мікроскопії Дослідження пофарбованих препаратів Кров: мікробіологічне дослідження Мікроскопія вірусів Поживні середовища Стерилізація лабораторного обладнання Середовища для дріжджів та грибів | ||
Приготування пропаратів для мікроскопії
Перш ніж докладно викладати методи приготування препаратів, слід зазначити, що з якості приготування препарату значною мірою залежить результат мікроскопії.
Предметне та покривне скло, що вживається для приготування препаратів, потребують спеціальної підготовки. Скло повинно бути чистим і добре знежиреним. Це може бути досягнуто різними способами. Скло кип'ятять 15 хвилин в 1% розчині соди (або в мильній воді), споліскують водою, кладуть у слабку соляну кислоту і, нарешті, добре промивають водою.
Зберігають скло в судинах (банках) з притертими пробками в суміші рівних кількостей спирту та ефіру або в 96° спирті або промитими і витертими насухо.
1) Дослідження мікроорганізмів у живому стані
Дослідження мікроорганізмів у живому стані застосовується головним чином для вивчення форми та рухливості бактерій, рідше при реакції аглютинації.
Дослідження у висячій та роздавленій краплі.
Дослідження проводять або у висячій, або в розчавленій краплі, тобто в краплі на предметному склі, покритому покривним.
Для висячої краплі необхідно мати спеціальне предметне скло з ямочкою.
Препарат «висяча крапля»
«Висячою краплею» зручнішекористуватися спостереження рухливості мікробів, їх розвитку, розмноження проростанням спор.
Для приготування препарату невелику краплю суспензії мікроорганізмів наносять на покривне скло, перевертають його краплею вниз і поміщають на спеціальне скло з поглибленням в центрі. (Рис. 1).
Рис.1 «Висяча крапля» Умовні позначення:
1- предметне скло з поглибленням у центрі,
2 - покривне скло,
3 – крапля суспензії мікроорганізмів.
Якщо мають справу з культурою на рідкому середовищі, то маленьку крапельку культури прямо наносять на ретельно вимите покривне скло; якщо ж є культура на щільному середовищі, то на покривне скло попередньо наносять маленьку крапельку водопровідної води або фізіологічного розчину, потім петлею торкаються культури і бактерії, що пристали до неї, розмішують у приготованій крапельці. Можна також заздалегідь приготувати завис мікроорганізмів у фізіологічному розчині і взяти крапельку з неї. У тому й іншому випадку на покривне скло накладають предметне скло з ямочкою посередині, краї якої попередньо обмазані вазеліном. Предметне скло злегка притискають до покривного, в результаті чого обидва скла склеюються. Після цього препарат перевертають покривним склом догори. Виходить герметично закрита камера, де крапля довго не висихає. Під мікроскопом край краплі спочатку шукають зі слабким збільшенням і при звуженій діафрагмі, а потім досліджують препарат за допомогою сильнішої сухої системи.
При користуванні простим предметним склом матеріал (фізіологічний розчин і культуру) наносять на предметне скло, яке покривають покривним. Крапельки матеріалу треба брати такої величини, щоб вони заповнювали весь простір між покривним та предметним.склом і не виступали за краї покривного. Препарат можна розглядати як із сухими системами, так і з імерсійною. Дуже добре розглядати живі бактерії за допомогою фазово-контрастної або аноптральної установки. Препарати на простих предметних стеклах швидко висихають, тому, якщо їх доводиться розглядати не одразу, а через деякий час, їх поміщають у вологу камеру (чашку Петрі), на дно якої покладено 2-3 вологих кружечка фільтрувального паперу, покритих двома сухими.