ВПЛИВ ІМУНОДЕФІЦИТНОЇ ВАГІТНОСТІ НА ПРОТИПУХЛИННИЙ ІМУНІТЕТ ПОТОМСТВ - Успіхи
Розвиток клінічної імунології в останні два десятиліття призвело до накопичення величезного матеріалу щодо оцінки імунного статусу при різних захворюваннях. Досить широко на практиці охорони здоров'я став застосовуватися термін вторинні імунодефіцити. Згідно з Міжнародною класифікацією хвороб (X перегляд), під терміном «вторинний імунодефіцит» слід розуміти порушення імунітету, що виникають внаслідок соматичних та інших хвороб, а також інших факторів [2]. До розвитку вторинних імунодефіцитів можуть призводити: незбалансоване харчування, гострий та хронічний стрес, ендокринна патологія, ятрогенні фактори (тривала терапія антибіотиками, цитостатиками, глюкокортикостероїдами, імунодепресантами тощо), протозойні, бактеріальні, бактеріальні та бактеріальні стани , Екологічні фактори. злоякісні новоутворення. Ракові пухлини можуть розвиватися внаслідок вже наявного імунодефіциту при впливі канцерогенних агентів.
Вторинна імунна недостатність супроводжується, як правило, дисфункціями імунної системи, що проявляються змінами процесів диференціювання, проліферації та взаємодії її клітин, що призводять до зниження імунної відповіді. В останні десятиліття спостерігається постійне зростання ВІН, здатної ускладнювати перебіг будь-якої патології людини, погіршувати прогноз та різко знижувати якість життя [3].
Вагітність як така є фізіологічним імунодефіцитним станом. У здорової вагітної жінки спостерігається знижена стійкість до інфекцій та загострення симптоматики аутоімунних захворювань. А вагітність у стані хронічного імунодефіциту негативно впливає на здоров'я як матері, так і її потомства.
Мета дослідження – вивчити вплив імунодефіцитноївагітності на анатомію та гістофізіологію тимусу потомства в умовах впливу канцерогену та без нього.
Як експериментальну модель вторинного імунодефіциту було обрано видалення селезінки. Робота виконана на 60 білих нелінійних щурах-самцях у віці 3 та 6 місяців. Тварини були поділені на 4 групи. Перша - щури, що народилися від здорових самок, яким для контролю вводили ізотонічний розчин хлориду натрію. Друга – щури, що народилися від здорових самок, яким внутрішньочеревно вводили канцероген (1,2-диметилгідразин) з розрахунку 10 мг/кг 1 раз на тиждень протягом чотирьох тижнів. Третя група - щури, що народилися від самок на тлі спленектомії, яким для контролю вводили ізотонічний розчин хлориду натрію. Четверта група – щури, що народилися від самок на тлі спленектомії, яким внутрішньочеревно вводили канцероген (1,2-диметилгідразин) з розрахунку 10 мг/кг 1 раз на тиждень протягом чотирьох тижнів.
Об'єктом дослідження був тимус. В роботі використовувалися імуногістохімічні (з використанням антитіл до антигенів макрофагів (CD68), дендритних клітин (білок S-100), нейроендокринних клітин АПУД-серії (синаптофізін і хромогранін А)), люмінесцентно-гістохімічні (методи Фалька-Хілларпа катехоламінсодержащих структур і Кроса-Евена-Роста для виявлення гістамінсодержащих структур), загальногістологічні (забарвлення гематоксилином-еозином, забарвлення за методом Унна на огрядні клітини) та статистичні методи дослідження.
У процесі дослідження злоякісні новоутворення були виявлені в обох групах щурів із введенням канцерогену, однак у щурів, що народилися від спленектомованих щурів, клітини пухлини виявилися менш диференційованими, окремі пухлини мали більший розмір, та їх кількістьдосягало в окремих випадках трьох макроскопічно видимих потовщень.
При аналізі росто-вагових показників було виявлено, що щури, що народилися від спленектомованих самок, відстають від своїх ровесників. Так, маса щурів, що народилися від здорових самок (1 і 2 групи) на обох термінах перевищує масу щурів, що народилися від спленектомованих самок (3 і 4 групи), а щури, яким вводили канцероген, відстають по масі від тих, яким вводили розчин хлориду натрію. Аналогічні зміни спостерігаються при підрахунку абсолютної та відносної маси тимусу.
При морфометричному дослідженні тимусу було виявлено наступне. Частки тимусу щур від здорових самок добре відмінні і розділені між собою сполучнотканинними перегородками, в часточці візуалізується темна кіркова речовина, розташована на периферії, і світліша мозкова речовина в центрі. Частки правильної округлої форми. При дослідженні тимусу щурів, що народилися від спленектомованих матерів, помітно зміщення мозкової речовини в деяких часточках на периферію. Частки неправильної форми, витягнуті. Площа мозкової речовини та товщина кіркової речовини зменшено в середньому на 35 % та 8 % відповідно у групі щурів, що народилися від спленектомованих матерів з подальшим введенням канцерогену. На терміні 6 місяців у тимусі щурів тієї ж групи виявляється подальше зменшення цих показників, спостерігається більш виражена деформація часток, заміщення паренхіми жирової та сполучної тканини. У щурів, що народилися від здорових самок, також виявляються ознаки інволюції тимусу, але динаміка цих змін не так виражена.
При мікроскопії тимусу пацюків від здорових самок на терміні 3 місяці в кожному полі зору виявляється від 3 до 10 опасистих клітин з переважанням серед нихнедегранулюючих і слабодегранулюючих клітин. У щурів, що народилися від спленектомованих самок, з подальшим введенням канцерогену (4-я група) на терміні 3 місяці також переважають клітини з низьким ступенем дегрануляції, проте загальна кількість клітин у полі зору більша і становить від 7 до 17 клітин. Нами було підраховано індекс дегрануляції за формулою Лінднера [1]. ВД = А×0+Б×1+В×2+Г×3/n, де А – число неактивних клітин нульового ступеня дегрануляції; Б - слабодегранулюючі огрядні клітини, (перша ступінь); В - клітини з помірним ступенем дегрануляції, (другий ступінь); Г - клітини з сильним ступенем дегрануляції, (3-я ступінь); n – загальна кількість опасистих клітин.
На терміні 6 місяців індекс дегрануляції у здорових щурів з першої групи підвищується незначно, чого не можна сказати про інші досліджувані групи. Вони спостерігається збільшення індексу на 20-30 %. При мікроскопії виявляється велике число дегранулюючих опасистих клітин у междольковых перегородках.
При порівнянні люмінесцентно-гістохімічних препаратів тимусу щурів виявлено збільшення кількості люмінесцентних гранулярних клітин (ЛГК) у тимусі щурів, що народилися від спленектомованих щурів (3 та 4 групи). При фарбуванні по Крос на гістамін виявляється картина зоряного неба. У кожній групі було обчислено співвідношення (серотонін+гістамін)/катехоламіни, що відображає сумарно-спрямовану дію біогенних амінів [4]. На терміні 3 місяці порівняно з першою групою в тимоцитах коркової та мозкової речовини вона дещо знижена у щурів, що народилися від спленектомованих самок, та підвищена у групах із введенням канцерогену. На термін 6 місяців значення співвідношення збільшується, що говорить про придушення функціональної активності тимусу. Причому в групі щурів, що народилися від спленектомованихсамок, з наступним введенням канцерогену, його збільшення більш значно.
Імуногістохімічні дослідження показали, що більшість клітин внутрішньої кортикальної, субкапсулярної зон і мозкової речовини у потомства інтактних щурів дає позитивну реакцію на білок S-100, що дозволяє віднести їх до дендритних клітин. До 10-12% клітин цих зон є CD68-позитивними і містять фермент лізоцим, виявляючи цим властивості істинних макрофагів. 15-20% ЛГК експресують синаптофізин і дають позитивну реакцію хромогранін А, тобто. відносяться до клітин АПУД-серії. У щурів дослідних груп спостерігається збільшення кількості клітин у всіх зонах тимусу, особливо у внутрішній кортикальній зоні в основному за рахунок дендритних клітин і макрофагів (рис. 1, 2).
а
Мал. 1. Імуногістохімічна реакція на білок S-100, ув.×100: а - часточка тимуса щура, що народився від здорового щура; б - часточка тимусу щура, що народився від спленектомованого щура. Стрілками вказані дендритні клітини
а
Мал. 2. Імуногістохімічна реакція на CD-68, ув.×100: а - часточка тимуса щура, що народився від здорового щура; б - часточка тимусу щура, що народився від спленектомованого щура. Стрілками вказані макрофаги
Виявлені нами морфофункціональні зміни в центральному органі імуногенезу у потомства спленектомованих щурів свідчать про передчасний розвиток у ньому інволютивних процесів, що проявляється у швидкому зменшенні її маси та об'єму, зменшення площі мозкової та товщини кіркової речовини. Збільшення кількості клітин мікрооточення, ймовірно, говорить про напруженість імунної відповіді та участь клітин тимусу в цих процесах. Зокрема, огрядні клітини, ймовірно, беруть участь у заміщенні паренхіми.тимусу сполучною тканиною. Клітини АПУД-серії модулюють імунну відповідь за допомогою секреції біогенних амінів. Дендритні клітини мігрують тимус для активації процесів негативної селекції незрілих Т-лімфоцитів. Макрофаги фагоцитують загиблі лімфоцити.
Таким чином, нами виявлено, що імунодефіцитна вагітність самок серйозно позначається на морфофункціональному стані тимусу пацюків. Враховуючи зміни, виявлені в ході експерименту, можна побічно сказати, що видалення селезінки у щурів-самок призводить до розвитку імунодефіциту у потомства. Вплив канцерогенного фактора призводить до більш виражених негативних змін морфологічного та функціонального стану клітин тимусу.