Гістохімічні дослідження ліпідів у тканинах
Під час обробки матеріалу враховують високу розчинність ліпідів в органічних розчинниках. Тому користуються зрізами, отриманими на мікротомі, що заморожує. Заливка в парафін і целлоидин проводиться лише за тих методів виявлення ліпідів, у яких їх попередньо переводять у нерозчинний стан (наприклад, впливом біхромату калію). Як фіксатор використовують формалін. Для збереження фосфатидів розчин формаліну рекомендується додавати 1% хлористого кальцію. У разі потреби матеріал може бути залитий у желатину. Забарвлені зрізи укладають у гліцерин, гліцерин-желатину та сироп фруктози.
Найчастіше використовують такі способи виявлення ліпідів. Забарвлення судановими барвниками (судан III, шарлах червоний, чорний судан) проводиться для сумарного виявлення ліпідів; Специфіка способу загальновизнана. Для визначення вільних жирних кислот застосовується фарбування ніль-блаусульфатом, при якому жирні кислоти забарвлюються в синій колір, а нейтральний жир - в рожевий, і реакція Фішлера, що дозволяє отримати синє забарвлення жирних кислот (нейтральний жир не забарвлюється). Ненасичені жирні кислоти разом з іншими ненасиченими сполуками можуть бути виявлені методом Сміта-Дітріха. Менш перевірені для визначення жирних кислот метод Гоморі із застосуванням солей свинцю та сульфіду амонію та рекомендація Окамото (К. Okamoto) використовувати у реакції Фішлера не гематоксилін, а пара-диметил-аміно-бензаль-роданін. Реакції Шиффа і Главінда дозволяють виявляти продукти окисного перетворення нейтрального жиру - альдегіди та перекису. Метод Бейкера – надійний спосіб виявлення фосфатидів. Можна також використовувати методи Чаччо і Менипика, проте вони, мабуть, менш надійні. Пірс (A. Pearse) пропонує використовуватидля виявлення фосфатидів медьсодержащіе фталоціаніни. Реакція Шультца виявлення холестерину та її естерів найбільш поширена. Вільний холестерин добре виявляється реакцією з дигітоніном.
Для визначення природи ліпіду, що виявляється, велике значення має виборча екстракція окремих груп ліпідів тими або іншими розчинниками. Розроблено схему послідовної екстракції невеликих зразків з дофарбуванням судановими барвниками [Кейліг (J. Keilig)]. Окамото та ін. пропонують метод диференційованого визначення фосфатидів, цереброзидів, сфінгомієліну і лецитину та окремо сфінгомієліну, використовуючи нітрат ртуті та обробку дифенілкарбазоном. У всіх випадках гістохімічного виявлення ліпідів доцільно проводити контроль ліпідної природи речовин, що виявляються. Як розчинник, що видаляє всі ліпіди, рекомендується підігріта суміш (1:1) метилового спирту та хлороформу.