Методичні рекомендації щодо відбору проб ґрунту для бактеріологічного дослідження на наявність
Збудник сибірки, потрапляючи у ґрунт, протягом багатьох десятиліть як зберігається, а й накопичується з допомогою багаторазових вегетацій і споруляций. При цьому стан інфікованості грунту є явище динамічне, схильне до мінливості в часі кількісному і якісному відношенні під впливом змінних умов навколишнього середовища. Найбільш сприятливими є такі фізико-хімічні характеристики ґрунтів: температура не нижче 12-15 ° С, вологість у межах 29-85%, рН - 5,3-7,3; наявність 1-14% гумусу, присутність 14-38 мг фосфору 6-18 мг калію на 100 г ґрунту. Залежно від перерахованих та цілого ряду інших факторів (антропогенний вплив, наявність актиноміцетів-антагоністів, вплив ризосфери вищих рослин) відбувається накопичення збудника сибірки у ґрунті або збереження одиничних мікробів із зміненими культурально-морфологічними властивостями та зниженою вірулентністю.
Збудник сибірки переважно знаходиться в грунті на глибині від 1,2 до 2 м, тому що саме на цьому рівні здійснювалося в минулому поховання трупів сибіркових тварин. Внаслідок зливових повеневих потоків, ерозійних процесів або антропогенної дії можливий винос збудника в поверхневий шар ґрунту, що становить до 40 см і найбільш небезпечний в епізоотичному та епідемічному відношенні. Крім того, поверхневе забруднення грунту відбувається при відмінку і вимушеному забої сибіркових тварин.
Систематичне бактеріологічне дослідження ґрунту в місцях відмінка, вимушеного забою або поховання сибіркових тварин є важливим моментом в системі протиепідемічних заходів і дозволяє здійснювати оперативне стеження за станом вогнищ сибірки.
Дотеперчасу відсутні уніфіковані підходи до відбору проб ґрунту та дотримання протиепідемічного режиму під час роботи на ділянках, заражених збудником сибірки.
Методика відбору проб ґрунту для бактеріологічного дослідження на наявність збудника сибірки та актиноміцетів-антагоністів.
Відбір проб ґрунту для бактеріологічного дослідження на ділянках поховання, у місцях відмінка або вимушеного забою сибіркових тварин проводиться за епідеміологічними показаннями, а також при здійсненні динамічного спостереження за осередком. При контролі активності вогнища у місцях поховання відбір проб ґрунту слід проводити у літньо-осінній період, найбільш сприятливий для вегетації збудника сибірки. Необхідно максимально охоплювати дослідженнями всю ділянку вогнища як за площею, і по глибині. Так як ймовірність бактеріологічної знахідки збудника сибірки у місцях поховання становить 1-2%, кількість проб з одного вогнища має становити не менше 100.
Робота з відбору проб проводиться у захисному костюмі ІІ типу із застосуванням дезінфікуючих засобів.
Бригада відбірників проб ґрунту складається з двох осіб. До місця відбору проб вона прямує на виділеному транспорті зі спеціальним укладанням (додаток 1).
1. На території вогнища вибирається ділянка розміром від 8 до 16 м, залежно від площі поховання.
2. Намічаються 5 точок відбору проб ґрунту (4 точки по кутах та одна в центрі) при відборі проб ґрунту на глибину до 2 м або 6 точок (4 точки по кутах та дві в центрі) при відборі проб на глибину до 1,6 м При похованні сибіркових тварин у траншеї відбір проб необхідно проводити в 5 або 6 точках (залежно від глибини відбору проб), розташованих по ходу траншеї.
3.Совком (ножем) проводиться розчищення намічених точок відбору проб від сміття, листя та трави.
4. Відбір проб ґрунту здійснюється за допомогою модифікованого бура Малькова (додаток 2).
5. Біля місця відбору проб ґрунту розстилається поліетиленова плівка розміром не менше 100x100 см, над якою відібраний ґрунт зсипається в мішечки.
6. За епідпоказаннями (при відмінку або прирізці сибірки тваринної) визначається поверхневе забруднення грунту збудником сибірки шляхом відбору проб у кожній наміченій точці на глибині до 40 см. При цьому кількість проб становить не більше 20.
При динамічному спостереженні за осередком (у місцях поховання сибіркових тварин) відбір проб грунту проводиться на глибині 1,6-2 метрів через кожні 10 см (рис.1).
7. Вага кожної проби, взятої в одній точці відбору, повинна дорівнювати 40-50 г (2 столові ложки).
8. Відібрані на кожній глибині з 5 або 6 точок проби поєднуються в один матер'яний мішечок, на якому простим олівцем відзначається глибина відбору проби (10, 20, 30 см і т.д.). Поліетиленові мішечки не використовуються, оскільки це може призвести до загибелі збудника або зміни його властивостей.
9. Пробу ґрунту для лабораторного дослідження на наявність актиноміцетів-антагоністів слід відбирати в одній із п'яти точок на глибині 20 см вагою 10 г в окремий поліетиленовий мішечок з метою створення сприятливих умов для збереження та накопичення актиноміцетів-антагоністів.
10. Для визначення хімічного складу ґрунтів пробу вагою 100 г відбирають у матер'яний мішечок в одній точці на глибині 20 см на контрольній ділянці з однотипною структурою ґрунтів, розташованому за 100 м від скотомогильника.
11. Пронумеровані мішечки із пробами ґрунтудля дослідження на наявність збудника антраксу поміщають по 5-6 штук у металеві пенали. В один із цих пеналів поміщають пробу ґрунту, призначену для дослідження на наявність актиноміцетів. Пробу для хімічного аналізу поміщають окремий пенал.
12. Після відбору проб залишки ґрунту, що знаходяться на поліетиленовій плівці, зсипають у шурфи, що утворилися. Зверху засипають хлорним вапном (200 г на кожен шурф) і зволожують. Використану поліетиленову плівку протирають ганчіркою, змоченою в 6% розчині перекису водню з 0,5% розчином миючого засобу.
13. Пенали із зовнішнього боку обробляють 6% розчином перекису водню з 0,5% розчином миючого засобу.
14. Бур, лопатку і совок (ніж) обпалюють полум'ям паяльної лампи, потім обробляють ганчіркою, змоченою 6% розчином перекису водню з 0,5% розчином миючого засобу.
15. Відбірники обробляють взуття 6% розчином перекису водню з 0,5% розчином миючого засобу і вирушають до місця стоянки транспорту, де знімають захисний одяг (маски, халати, косинки) і поміщають його в клейончастий мішок, обробляючи руки в гумових рукавичках 6% розчином перекису водню з 0,5% миючого засобу після кожної маніпуляції. Після зняття рукавичок миють руки з милом.
16. Пенали обклеюють лейкопластирем, бур і лопатку поміщають у чохол, виписують напрямки.
Відібрані проби ґрунту мають бути доставлені до лабораторії для дослідження протягом 1-3 діб.
Примітка. У разі травми з порушенням шкірних покривів у процесі відбору проб ґрунту в осередку сибірки необхідно промити рану водою з милом, обробити настоянкою йоду і накласти пов'язку. Надалі вжити заходів щодо екстреної профілактики захворювання на сибірку.
Прискладанні "Рекомендацій" використані:
1. Інструкція та методичні вказівки з лабораторної та клінічної діагностики, профілактики та лікування сибірки у людей.
2. Організація заходів щодо профілактики сибірки (методичні рекомендації).
3. Методичні вказівки щодо виявлення збудника сибірки у сировині тваринного походження та об'єктах зовнішнього середовища. Утв. Головним управлінням ветеринарії МСГ СРСР 1.II.79 р.
5. Методичні рекомендації щодо використання актиноміцетів-антагоністів для знезараження ґрунтів, забруднених збудником сибірки.