Миття та обробка лабораторного посуду
Посуд для бактеріологічних робіт має бути чистим, а для багатьох досліджень — і стерильним, оскільки використання забрудненого, погано вимитого посуду може призвести до отримання неправильних результатів.
Для миття лабораторного посуду в мікробіологічних лабораторіях відводиться окреме приміщення — мийне або спеціальне робоче місце, яке забезпечується великою раковиною з підведенням гарячої та холодної води, нагрівальними приладами: газовою або електричною плитою.
У мийній необхідно мати каструлі, тази, цебра, йоржі, щітки та дошки з кілочками для сушіння чистого посуду. На дно раковини кладуть густу металеву сітку, щоб попередити засмічення каналізаційної мережі частинками агару, ватою, папером, що потрапляють у воду під час миття посуду.
Написи, зроблені на склі восковим олівцем, легко знімаються щіткою або шматочком вологої марлі з крейдою або содою.
Для усунення нальоту білого кольору, що нерідко з'являється на склі, посуд поміщають на 30-40 хвилин у 5-10% розчин соляної кислоти.
Сильно забруднений посуд зі слідами жиру обробляють у хромовій суміші. Хромова суміш, будучи сильним окисником, руйнує органічні речовини з утворенням розчинних або газоподібних продуктів. Перед вживанням хромову суміш підігрівають до температури 45-50 ° С, а потім заливають нею брудний посуд. Працювати з хромовою сумішшю необхідно з обережністю, у фартуху та гумових рукавичках, після ретельно промивати посуд.
Миття нового лабораторного посуду. У відрі з теплою водою розчиняють господарське мило, щоб утворилася невелика кількість піни, занурюють посуд у неї і ставлять на слабкий вогонь. Після 15-хвилинного кип'ятіння посуд виймають, обполіскують чистою водою, занурюють у теплий 1-2%.розчин соляної кислоти доводять до кипіння і виварюють 10-15 хвилин, щоб нейтралізувати надлишок лугу, який міг залишитися при виготовленні скла. Після кип'ятіння в кислоті посуд прополіскують водопровідною водою і двічі дистильованою.
При миття посуду, що служить для постановки серологічних реакцій, кислоти та лугу використовувати не рекомендується, оскільки навіть сліди цих речовин, що залишилися на стінках, можуть спотворити результат реакції. Такий посуд миють гарячою водою, кладуть на сітки, щоб з нього стекла вода, потім кілька разів обполіскують дистильованою водою і сушать у сушильній шафі.
Миття лабораторного посуду, що був у вжитку. Посуд, в якому містився заражений матеріал, надходить у мийку після попередньої дезінфекції, що гарантує загибель патогенних мікробів, що знаходяться в ній. Перед миттям із пробірок, чашок та матраців знезаражену рідину виливають у каналізацію. Не дуже забруднений посуд миють йоржом у гарячій воді з милом, содою чи розчині гірчиці. Посуд зі слідами агару, желатину чи іншого живильного середовища протягом доби перед миттям заливають 2—2,5% розчином їдкого натру чи їдкого калі. Дуже забруднений жирний посуд, що не піддається миття звичайним способом, заливають на 30-40 хвилин хромовою сумішшю, а потім протягом тривалого часу промивають спочатку проточною водопровідною, потім дистильованою водою.
Надійний спосіб миття та знезараження лабораторного посуду запропоновано Г.П. Кірсановим (1972). Відпрацьований лабораторний посуд (пробірки, чашки Петрі, предметне скло з мазками після імерсійної мікроскопії тощо) стерилізують в автоклаві протягом 2 годин при 2 атм. Далі посуд завантажують у бак і заливають розчином, що містить на 100 мл дистильованої води 5 мл нашатирногоспирту та 3 г порошку для прання бавовняної та лляної білизни. Лабораторний посуд добре відмивається і знежирюється протягом 30 хвилин кип'ятіння у вказаному розчині, потім його прополіскують водопровідною водою та двічі дистильованою. Після цього посуд висушують у сушильній шафі. Для обробки посуду, що застосовувався для вирощування мікобактерій туберкульозу на яєчному поживному середовищі, О.В. Івановим та співавт. (1974) запропоновано простий спосіб. Використані пробірки з середовищами автоклавують при 1,5 атм протягом 30 хвилин, потім по 250-300 штук укладають у бачки або емальовані відра з щільною кришкою, заливають 1% розчином їдкого натру і кип'ятять 2 год. Під час кип'ятіння залишки живильного середовища розчиняються утворюється рідка однорідна мильно-лужна суміш, що сприяє звільненню пробірок від щільних залишків середовища. Після 2 год кип'ятіння мильно-лужний розчин зливають для повторного використання (розчин може бути використаний 3-4 рази). Прокип'ячені відмиті пробірки кілька разів прополіскують водопровідною водою і висушують.
Посуд, що використовується для приготування та зберігання поживних середовищ та культивування мікробів, не можна обробляти дезінфікуючими речовинами, оскільки навіть сліди їх роблять живильне середовище непридатним для розмноження мікроорганізмів.
Миття градуйованих піпеток. Піпетки та інший градуйований посуд, що надходить для роботи, повинні бути абсолютно чистими та добре знежиреними. На стінках погано знежиреного посуду при виливанні рідини залишається велика кількість крапель, внаслідок чого злитий об'єм рідини не відповідатиме тій величині, яка вказана на шкалі поділу.
Нові градуйовані піпетки, які не були у вжитку, миють таким чином. За допомогою гумовогобалончика, одягненого на піпетку, насмоктують у неї гарячу мильну воду і потім занурюють у посуд з такою самою водою. Щоб вода з піпеток не витікала, рівень рідини в посудині повинен відповідати висоті піпеток. Витримавши 20-30 хвилин у мильному розчині, піпетки прополіскують водопровідною водою і переносять в 1-2% розчин соляної кислоти, який поступово доводять до кипіння. Далі піпетки обробляють так само, як і решту скляного посуду.
Піпетки, що були у вживанні, ретельно протирають тонким пружним дротом, на кінець якого щільно накручують шматочок вати або марлі у вигляді сливи. Для того, щоб забруднення знімалися швидше і легше, користуються гарячою мильною водою, розчином питної соди або прального порошку.
Закупорився канал піпетки прочищають тонким дротом або мандрен від тонких голок шприців. Промиті піпетки складають у таз, заливають теплим розчином гірчиці або мильною водою та ставлять на слабкий вогонь. Після 20-30-хвилинного кип'ятіння піпетки виймають і кілька разів обполіскують спочатку теплою проточною, а потім дистильованою водою.
Сильно забруднені піпетки також очищають спочатку йоржом з милом або содою, а потім занурюють у хромову суміш, налиту у ванну або банку, по висоті відповідну довжині піпеток, що обробляються. У хромовій суміші піпетки витримують 20-30 хвилин, потім протягом декількох хвилин промивають проточною і двічі обполіскують дистильованою водою.
Миття предметного та покривного скла. Предметне та покривне скло повинно мати абсолютно чисту поверхню і бути добре знежиреним. Крапля води, нанесена на знежирене скло, розтікається рівномірно, але в погано знежиреному склі розпадається на дрібні крапельки. Предметне та покривне скло рекомендується мити таобполіскувати в гумових рукавичках, щоб не забруднювати їх жиром, що знаходиться на поверхні шкіри.
Скло предметне і покривне, що не було у вживанні, миють у теплій мильній воді і після ополіскування заливають сумішшю Никифорова (етиловий спирт:ефір у співвідношенні 1:1). Якщо скла, вийняті через 2-3 дні із суміші Никифорова, зберігають сліди жиру, їх складають у порцелянову чашечку, заливають 2-5% розчином гідрокарбонату натрію або їдкого натру, ставлять на слабкий вогонь і кип'ятять, рахуючи від моменту закипання води, протягом 20-30 хвилин. Після кип'ятіння в лужному розчині скла обполіскують проточною водопровідною водою, опускають на 10-15 хвилин в 5-10% розчин соляної кислоти, і потім промивають проточною та дистильованою водою.
Предметне та покривне скло, що було у використанні, забруднене фарбою та іммерсійною олією, обробляють наступним способом:
- опускають на 2 години в концентровану сірчану кислоту або хромову суміш, потім ретельно промивають проточною водопровідною водою;
- Заливають 5% розчином гідрокарбонату натрію або лугу (їдке калі або їдкий натр), ставлять на слабкий вогонь і кип'ятить протягом 30-40 хвилин.
Силіконування лабораторного посуду. Ретельно вимитий та знежирений посуд висушують і заливають на кілька хвилин при кімнатній температурі 3% розчином поліметилсилоксанової рідини (марка ПМС-200 або ПМС-300) у хлороформі. При цьому на поверхні скла утворюється найтонша органосіліконова плівка з хорошими гідрофобними та адгезивними властивостями. Рідина можна використовувати багаторазово. Оброблений таким чином посуд поміщають на 2 години в сушильний шафа при температурі 180-210 ° С, після цього посуд готовий до вживання. Плівка не змивається водою та не руйнується кислотами. Для її видаленняпосуд слід протягом 2 год кип'ятити в 10% розчині лугу.
Сушіння та зберігання чистого лабораторного посуду. Висушений посуд переглядають світ. Скло її має бути абсолютно прозорим, без матового нальоту та плям.
Вимитий посуд не витирають, а сушать при кімнатній температурі (холодне сушіння) або гарячим повітрям у сушильній шафі при температурі 100-105°C.
Чисто вимитий і висушений посуд, закритий пробками з паперовими ковпачками або без них, зберігають у місцях, надійно захищених від пилу, найкраще в шафі, що щільно закривається.