Спосіб лікування бруцельозу
Винахід відноситься до медицини, інфекційних хвороб і може бути використане для лікування бруцельозу. Перорально вводять імуномодулятор і антибіотик, включених попарно в загальну ліпосомальну везикулу, при цьому як антибіотик вводять пефлоксацин або азитроміцин, а в якості імуномодулятора - лікопід або левамізол. Даний винахід сприяє прискоренню елімінації бруцел з організму, що, у свою чергу, сприяє скороченню термінів лікування. 1 табл.
Винахід відноситься до медицини, а саме до лікування бруцельозу.
Відомий спосіб лікування бруцельозу антибіотиками.
Недоліком цього способу є зниження ефективності в лікуванні даної інфекції раніше застосовуваних антибіотиків, пов'язане з їх низькою здатністю проникати всередину клітини і з бруцелл, що розвивається, резистентністю до них. Крім того. при бруцельозі спостерігається виражене пригнічення клітинного імунітету та неспецифічної резистентності організму, що призводить до накопичення у фагосомах життєздатних бруцел, здатних до розмноження, і, як наслідок, до появи рецидивів хвороби та розвитку хронічного інфекційного процесу. Тривалий курс антибіотикотерапії ще більше посилює імунодепресію.
Відомий спосіб лікування бруцельозу, в якому антибіотики застосовуються у поєднанні з імуномодуляторами (Таран І.Ф., Швецова Н.М., Сафронова В.М. Вплив імуномодуляторів на розвиток інфекційного та вакцинального процесів, а також на ефективність лікувальних препаратів при бруцельозі // ЖМЕІ.- 1993.- №6.-C.88-89: Thornes R.D. Такий спосіб дозволяє впливати на імунну систему макроорганізму. Застосовувані імуномодулятори активізують фагоцитарні клітини та стимулюютьнеспецифічну резистентність організму, але, найчастіше, і при комплексному застосуванні антибіотиків та імуномодуляторів спостерігається недостатня ефективність проведеної терапії, виникають рецидиви та перехід хвороби у хронічну форму.
Технічним завданням винаходу є підвищення ефективності лікування бруцельозу.
Сутність винаходу полягає у тому. що заявляється спосіб лікування бруцельозної інфекції заснований на застосуванні імуномодулятора та антибіотика, включених у загальну ліпосомальну везикулу.
Ліпосомальні форми ліків нині застосовуються на лікування інфекційних захворювань. Ліпосоми дозволяють доставляти ліки до клітин-мішеней, сприяють подоланню мембранно-клітинних бар'єрів. Використання їх як носіїв ліків забезпечується унікальністю їх сукупних властивостей, таких як відсутність токсичності, імуногенності та алергічних реакцій організму у відповідь на введення ліпосом, а також їх біосумісність, биодеградируемость і здатність пролонгувати дію іммобілізованих в них речовин з доставкою останніх внутрішньо клітин [3] . У макроорганізмі ліпосомальні антибіотики захоплюються клітинами мононуклеарної фагоцитарної системи, а в органах, що містять велику кількість макрофагів, створюється підвищена концентрація препарату, причому більш тривалий проміжок часу, ніж при використанні вільного антибіотика.
В даний час ліпосомальні форми антибіотиків застосовуються при лікуванні бруцельозної інфекції (Тихонов Н.Г., Ротов К.А., Перепелкін А.І. Ліпосомальний гентаміцин у лікуванні експериментального бруцельозу // Проблеми біологічної та екологічної безпеки: Міжнар. конф. - Оболенськ, 2000. - С. 95-96: Vitas A.I., Diaz R., Gamazo C. Protective effect of liposomalgentamicin проти systemic acute murine brucellosis // Chematherapy. – 1997. – V.43. №3. – P. 204-210).
Технический результат заявляемого способа, а именно увеличение эффективности лечения бруцеллеза, обеспечен за счет применения дополнительно в лечении бруцеллеза иммобилизованных в общую липосомальную везикулу антибиотика (азитромицина или пефлоксацина) с иммуномодулятором (ликопидом или левамизолом), что является существенным отличительным признаком и критерием патентоспособности “новизна” .
Заявляється спосіб здійснювався в такий спосіб.
Проводили вивчення дії антибактеріальних (азитроміцину, пефлоксацину) та імуномодулюючих (лікопіду, левамізолу) засобів, ефективних при бруцельозній інфекції та різняться механізмом дії, на результати лікування бруцельозу.
Застосування пефлоксацину, азитроміцину, лікопіду, левамізолу та ліпосом при лікуванні бруцельозу відоме, але тільки в заявляється способі використовуються лікопід або левамізол, іммобілізовані в загальні ліпосомальні везикули з пефлоксацином або азатроміцином.
Ефективність ліпосомальних форм імуномодуляторів та антибіотиків у лікуванні бруцельозу вивчали на білих мишах, чутливість яких до брунелл найбільш близька до чутливості організму людини. Це дозволяє екстраполювати отримані в дослідах результати клінічних умов. Хронічну бруцельозну інфекцію моделювали шляхом підшкірного введення білим мишам високовірулентного штаму Brucella melitensis 565 в дозі 0.10 мікробних клітин в 0,5 мл 0.9% хлориду натрію, рН 7,2. Лікування розпочинали з 21 доби після інфікування та проводили 2 курсами з інтервалом 10 діб. Тварини 1 групи (контрольна) лікування не проводили; біологічним моделям 2 та 3 групвводили лише антибіотик; 4, 5, 6 та 7 груп - антибіотик та імуномодулятор у вільній формі; 8, 9, 10 та 11 груп - антибіотик та імуномодулятор, іммобілізовані в загальну ліпосому (див. таблицю).
Лікарські речовини білі миші отримували перорально, азитроміцин (“Сумамед”, Плива, Республіка Хорватія) курсовою дозою 2,6 мг/миша, пефлоксацин (“Абактал”. Лік л.д., Любляна, Словенія) – 20 мг/миша (антибіотики). застосовували в субтерапевтичних дозах), левамізол ("Декаріс", Гедеон Ріхтер А.О., Будапешт, Угорщина) - 50 мкг/миша, ліконід (ЗАТ Пептек, Москва) - 100 мкг/миша. Препарати у вільній формі тварини отримували щодня, при лікуванні азитроміцином курсову дозу всіх лікарських засобів, що використовуються з ним, вводили протягом 4 діб, при терапії пефлоксацином - протягом 10 діб. Ліпосомальні форми ліків біологічним моделям вводили 1 раз на 48 годин. Курсову дозу ліпосом, що містять азитроміцин з одним з імуномодуляторів, миші отримували в 2 прийоми, а ліпосом, що містять пефлоксацин з імуномодулятором, в 5 прийомів.
Тварин досліджували через 14 діб після закінчення кожного курсу лікування, оскільки на 10-12 добу після завершення антибіотикотерапії у разі збереження життєздатних бруцел у клітинах ретикулоендотеліальної системи білих мишей відбувається вихід мікробів у кров'яне русло, та спостерігається активізація інфекції. Про ступінь звільнення організму експериментальних тварин від бруцел судили за даними бактеріологічного аналізу, який проводили шляхом посіву гомогенізованих пахових, аксиллярних, підщелепних, парааортальних лімфовузлів та селезінки, взятих від умертвлених тварин, на агар Альбімі, рН 7,2. Критерієм інтенсивності бактеріального обсіменіння організму мишей служили індекс висівання - приватна від поділу кількості органів.з позитивними висівами кількість всіх досліджених органів; індекс обсіменіння - відношення суми балів, що характеризують зростання, до суми можливої максимальної кількості балів; кількість вільних від інфекції тварин.
Статистичну обробку отриманих результатів проводили загальноприйнятими методами із визначенням середніх арифметичних, середньої помилки середніх арифметичних, достовірності відмінностей. Відмінності вважали достовірними при р
Проведення лікування експериментальної бруцельозної інфекції білих мишей з використанням азитроміцину або пефлоксацину у субтерапевтичних дозах у комплексі з вільними формами лікопіду або левамізолу (4-7 групи) призводило до збільшення елімінації бруцел з організму хворих тварин порівняно з результатами лікування в режимі антибактеріальної монотерапії. При цьому бактеріологічні індекси достовірно знижувалися, а кількість мишей, що звільнилися від інфекції, збільшувалася.
Результати експериментів показали, що пероральне введення ліпосомальних імуномодуляторів з антибіотиком білим мишам з бруцельозною інфекцією сприяло більш вираженому зниженню інтенсивності обсіменіння збудником організму біологічних моделей і значною мірою підвищувало ефективність етіотропного лікування бруцельозу. Використання в комплексному лікуванні експериментального бруцельозу всіх комбінацій лікопіду, левамізолу, азитроміцину та пефлоксацину, при включенні попарно антибіотика та імуномодулятора в загальну ліпосому, суттєво впливало на інтенсивність елімінації бруцел з організму біологічних моделей. Спостерігалося більш виражене зниження індексів висівності та обсіменіння та збільшення кількості вільних від інфекції тварин після закінчення лікування, ніж після проведеного лікування з використаннямвільних форм вищезгаданих антибіотиків та імуномолуляторів в аналогічних парах.
Лікування ліпосомальними везикулами, що включають азитроміцин та лікопід, сприяло збільшенню кількості вільних від бруцел мишей на 20,2±1,1%; везикулами, що містять азитроміцин та левамізол - на 16,4±0,9%; ліпосомами з пефлоксацином та лікопідом - на 22,3+1,0%; а лікування пефлоксацином і левамізолом, укладеними в загальну ліпосому, збільшувало кількість тварин, що звільнилися від збудника, на 18,1±0,8% порівняно з результатами терапії із застосуванням азитроміцину або пефлоксацину з лікопідом або левамізолом у вільній формі.
Таким чином, встановлено, що лікування експериментальної бруцельозної інфекції антибіотиком (азитроміцином плі пефлоксацином) з імуномодулятором (левамізолом або лікопідом), включеними в загальну ліпосомальну везикулу, є більш ефективним, ніж лікування вільними формами аналогічних препаратів при пероральному шляху.
1. 3акревський В.І., Єфременко В.І., Мельников В.А із співавт. Приготування ліпосом, що містять біологічно активні речовини Методичні рекомендації. - Волгоград, 1982. - 23с.
2. Інструкція з визначення чутливості збудників небезпечних інфекційних захворювань до антибіотиків та хіміопрепаратів. - М., 1990.-36с.
3. Швець В.І., Краснопільський Ю.М. Ліпіди в лікарських препаратах // Вестн. Акад. Мед. наук СРСР. - 1990. -. №6. – С. 19-28.
4. Cafiso D.C., Petty H.R., MeConnell H. Управління unilamellar lipid vesicles на 37C по vaporization method Biochim. et biophys acta.- 1981.-Vol.649.-P. 129-131.
5. Pica U. Ліпосоми з великими трепінгом здатності preparated by freezing //Arch. Biochem. and Biophys. - 1981. - Vol.212. - P. 186-194
Спосіб лікування бруцельозу, що включає пероральне введення ліпосом з антибіотиком, який відрізняється тим, що в якості антибіотика вводять пефлоксацин або азитроміцин і додатково - імуномодулятор - лікопід або левамізол, який попарно включений із зазначеним антибіотиком в загальну ліпосомальну везику.