Спосіб лікування станів, що супроводжуються гіперагрегацією тромбоцитів
Винахід відноситься до медицини та призначене для лікування станів, що супроводжуються гіперагрегацією тромбоцитів. Для цього до аутоплазми додають аденозинтрифосфорну кислоту (АТФ), визначають її кількість, достатню для максимальної агрегації тромбоцитів, і вводять її в такий же обсяг інтактної аутоплазми. Потім її центрують і надсадкову рідину (аутогемокомпонентний препарат), що виходить, вводять внутрішньовенно в кількості 5,0 -10,0 мл. Спосіб дозволяє ефективно лікувати стани, що супроводжуються гіперагрегацією тромбоцитів. 2 табл.
Пропоноване винахід відноситься до терапії і призначене для лікування стану та захворювань, що супроводжуються гіперагрегацією тромбоцитів. В даний час в результаті численних експериментальних та клінічних досліджень встановлено, що підвищена здатність тромбоцитів до агрегації супроводжує перебіг низки важких хвороб людини: інфаркту міокарда, серцевої та церебральної ішемії, атеросклерозу, цукрового діабету, гіпертонічної хвороби та ін. При цукровому діабеті, зокрема, гіперкоагуляція є одним із етіологічних факторів діабетичних ангіопатій, які стають провідною причиною інвалідизації та смертності хворих. Гіперагрегація призводить до накопичення в циркулюючій крові тромбоцитарних агрегатів і зрештою до оклюзії судин. Відомо, що при прогресуванні вищезгаданих захворювань наростає гіперкоагуляція крові та депресія фібринолізу.
У терапії та профілактиці захворювань та станів, що супроводжуються гіперагрегацією тромбоцитів, в даний час широко використовують антиагреганти: пентоксифілін (трентал); тиклопід (тиклід).
Недоліком вищевказаних препаратів як при внутрішньовенному, так і при їх оральному застосуванні є геморагічніускладнення, тромбопенія, лейкопенія, агранулоцитоз, виражені алергічні реакції, а також неможливість використання цих препаратів через їх протипоказання при вираженому склерозі коронарних судин та судин мозку, при загостренні виразкової хвороби шлунка та дванадцятипалої кишки, захворюваннях печінки.
Завданням запропонованого способу є отримання препарату, який розширює діапазон використання і дозволяє отримати бажаний ефект, що дезагрегує, за відсутності побічних геморагічних ускладнень і т.д. за рахунок використання препарату, що має як дезагрегуючий, так і фібринолітичний ефект.
Виходячи з цього було поставлено завдання, одержання препарату з аутоплазми, що має дезагрегуючу та фібринолітичну дію. Так як у тромбоцитарній пробці переважають речовини, що пригнічують фібриноліз і агреганти, речовини ж протилежної дії у міру формування тромбоцитарного згустку (тромба) виділяються тромбоцитами в плазму і відносяться струмом крові, то тому, запустивши механізм незворотної агрегації ( , отримують плазму - аутогемокомпонентний препарат, що має дезагрегуючу та фібринолітичну дію. Формування тромбоцитарної пробки, тобто. запуск механізму незворотної агрегації відбувається при дії на тромбоцити тромбіну, колагену та АДФ (аденозин дифосфорної кислоти). Вищезазначені агреганти широко використовуються в клініко-лабораторній практиці. Відомо, що аденозин трифосфорна кислота (АТФ) не відносять до агрегатів і тому в цій якості її ніколи не використовували в клініко-лабораторній практиці. Проте ще 1965 р. G. Marr показав, що у плазмі вже за кілька секунд 50% АТФ перетворюється на АДФ (Баркаган 3.С.,"Геморагічні захворювання та синдроми". М., 1980, с. 12-13).
Дослідження показали, що при запропонованому способі лікування станів, що супроводжуються гіперагрегацією тромбоцитів шляхом внутрішньовенного введення аутогемокомпонентного препарату, достовірно знижується агрегація тромбоцитів (P 0,01) (див. табл. 1). Крім цього, в аутопрепараті порівняно з інтактною плазмою відбуваються такі якісні та кількісні зміни: підвищується концентрація плазміногену (P 0,01), знижується (P 0,01); концентрація інгібіторів протеолітичних ферментів (1 – інгібітор протеаз; 2 – макроглобулін), знижується (P 0,01) концентрація фібриногену та фібронектину при одночасному підвищенні фібринолітичної активності (P 0,01) (див. табл. 2). Методики визначення зазначених у таблиці показників загальновідомі (Калашніков B. B., Маркова 0.А., Платонова Т.К., Свищев A.B. // Тези міжнародного симпозіуму "Проблеми розвитку робіт з лабораторно-діагностичної техніки". ВНМТО МОЗ СРСР, Смоленськ, 1988 41-44 та с.47-50;Андрєєнко Г.В., Карабасова М.А., Лютови Л.В. та ін "Методи дослідження фібринолітичної системи крові. - М., Видавництво Московського Університету, 1981, с, 43-46;Манчіні Г., Ваерман І.П., Карбонава А.0.Гереманс І.Е. , London, New-Jork, 1964;11th colloguirn, Brudes, 1963, p. 370-373). послужили передумовою запропонованого способу лікування.
Спосіб здійснювався наступним чином: кров беруть з ліктьової вени в кількості, як правило, 10,0 мл, шприцом ємністю 10,0 мл, в якому знаходиться антикоагулянт - гепарин у кількості 34 ОД. Далі визначають агрегацію тромбоцитів за відомим способом Born-O'Brien (Born VR). використовували у кількості 0,1-0,5 мг/мл залежно від індивідуальної реакції тромбоцитів на дію АТФ для досягнення максимальної агрегації тромбоцитів (в середньому до 50% падіння оптичної густини тромбоцитів). Потім отриману суспензію центрифугували при швидкості 3000 об/хв протягом 2-3 хв і отриману таким чином надосадову рідину (аутогемокомпонентний препарат) вводили внутрішньовенно в кількості 5,0-10,0 мл.
Приклад 1. Хворий Н.І.Д., 37 років. Діагноз. Цукровий діабет. Препроліферативна діабетична ретинопатія обох очей. Страждає на цукровий діабет протягом 20 років. Зниження гостроти зору на обидва ока відзначає останні 2 роки. Коефіцієнт агрегації тромбоцитів підвищений – 165,0 мм. Протягом 4 років приймає трентал та тиклід, проте коефіцієнт агрегації тромбоцитів залишається різко підвищеним.
До лікування. Коефіцієнт агрегації тромбоцитів 170 мм. На флюоресцентній ангіограмії очного дна обох очей виявлені зони ішемії сітківки. Гострота зору: правого ока –0,3 з корекцією = 0,4, лівого ока – 0,3 з корекцією = 0,5.
Лікування. Кров брали з ліктьової вени 20,0 мл стерильним шприцем ємністю 10,0 мл, в якому до забору крові був гепарин 34,0 ОД. Загальноприйнятим способом відокремлювали еритроцити від плазми. Отриману плазму ділили для зручностіна порції 2,0 мл. У першій визначали агрегацію тромбоцитів (за вищевказаним методом), додаючи поступово АТФ. Максимальної агрегації тромбоцитів було досягнуто при сумарному введенні АТФ 0,4 мг/мл. В інші порції інтактної плазми одномоментно вводили таку ж кількість АТФ -0,4 мг/мл і після досягнення максимальної агрегації тромбоцитів проводили центрифугування при швидкості обертів 3000 об/хв протягом 2-3 хв і отриману таким чином надосадову рідину (аутог) внутрішньовенно у кількості 5,0-10,0 мл, через 14 діб, всього 5 ін'єкцій.
Результати лікування. Коефіцієнт агрегації тромбоцитів знизився до верхньої межі норми – 41,0 мм. Гострота зору підвищилася на 0,1 кожному оці; зменшилася кількість зон ішемії сітківки.
Приклад 2. Хворий Ш.В.А., 58 років, страждає на ішемічну хворобу серця (стенокардією напруги) близько 9 років. За останній рік болі в області серця почастішали до 4-5 разів на добу, незважаючи на максимальний режим прийому сустка, нітронгу та панангіна, больовий синдром не купувався до 2 год, біль супроводжувався почуттям нестачі повітря (задишкою) та прискореним серцебиттям. Крім змін на електрокардіограмі, характерних для ішемічної хвороби серця, було підвищено майже в 5 разів (180,0 мм) коефіцієнт агрегації тромбоцитів.
Лікування проводилося аутогемокомпонентним препаратом (на тлі звичайного лікування – нітронг, сустак), який вводили внутрішньовенно у кількості 5,0-10,0 мл, на курс лікування потрібно 4 ін'єкції. На другу добу після розпочатого лікування стан хворого помітно покращився – зникла задишка, частота та інтенсивність болю в ділянці серця зменшилися при дослідженні агрегації тромбоцитів – виявлено виражений дезагрегаційний ефект. Коефіцієнт агрегації знизився до 46 мм.Крім того, на ЕКГ відзначено позитивну динаміку процесу, що свідчило про ефективність використаного препарату.
Спосіб лікування станів, що супроводжуються гіперагрегацією тромбоцитів шляхом внутрішньовенного введення препарату - дезагреганта, який відрізняється тим, що як дезагрегант використовують аутогемокомпонентний препарат, що являє собою надосадову рідину аутокрові хворого, отриману в результаті агрегації тромбоцитів під одномоментним впливом 0 1 мл плазми та подальшого центрифугуванням, причому препарат вводять у кількості 5,0 - 10,0 мл.