Спосіб профілактики пастерельозу птахів живою вакциною - патент Україна 2310472 - Каширін Володимир
Винахід відноситься до галузі біотехнології. Спосіб включає вакцинацію птахів живою вакциною. Як живу вакцину використовують блоковані по інвазивності дією низької температури при ліофілізації ослаблені термолабільні пастерели. При цьому пастерели попередньо регідратують у дозі 0,5 млрд м.к. 0,2-1,5 мл фізіологічного розчину. Потім у цій же дозі щеплюють птицю на слизову оболонку носової та ротоглоткової порожнин інтраназально або орально шляхом закапування, впорскування або зрошення. Птах також прищеплюють назально-орально шляхом дворазового занурення її дзьоба по носові отвори в робочий розчин вакцини і спостерігаючи рефлекс ковтального руху. Після чого вакцинований птах містять не менше 10 діб при 15. 25 (оптимум 20 ° С) навколишнього середовища. Спосіб дозволяє прищепити живу вакцину безпечно, без ускладнень та створити в організмі напружений специфічний імунітет до пастерельозу. 4 табл.
Пропонований винахід відноситься до галузі мікробіології та біотехнології та призначено для профілактики пастерельозу птахів за певних умов вакцинації їх живою вакциною,
Загалом аналіз застосування живої вакцини проти пастерельозу птахів свідчить про принципово важливе значення шляху та місця (способу) введення її в організм, причому як діофілізовану (суху), регідратовану у фізіологічному розчині.
Завданням винаходу є створення напруженого специфічного імунітету у птахів до пастерельозу шляхом організації умов нешкідливого щеплення живої вакцини.
Поставлене завдання досягається тим, що як жива вакцина використовують блоковані по інвазивності дією низької температури при ліофілізації ослаблені термолабільніпастерели. Ліофільно висушену живу вакцину попередньо регідратують у дозі 0,5 млрд. м.к. в 0,2-1,5 мл фізіологічного розчину і в цій дозі щеплюють на слизову оболонку носової та ротоглоткової порожнин інтраназально або орально шляхом закапування, впорскування або зрошення, або назально-орально шляхом дворазового занурення дзьоба птиці по носові отвори в робочий розчин рефлексу ковтального руху. З моменту вакцинації птаха містять не менше 10 діб при допустимому оптимальному діапазоні температури навколишнього середовища 15-25°С (оптимум 20°С). У птахів за таких умов вакцинації поступово, безперешкодно розвивається напружений специфічний імунітет. У поствакцинальному періоді для птахів з розвиненим напруженим специфічним імунітетом відхилення температури навколишнього середовища від допустимого оптимального діапазону зазвичай не становлять небезпеки (ускладнення через щеплення живої вакцини не спостерігаються).
Істотною відмінністю є те, що як жива вакцина використовують блоковані по інвазивності дією низької температури при ліофілізації ослаблені термолабільні пастерели, які сухими попередньо регідратують в дозі 0,5 млрд. м.к, в 0,2-1,5 мл фізіологічного розчину і у цій дозі прищеплюють на слизову носову та ротоглоткову порожнини інтраназально або орально шляхом закопування, впорскування або зрошення, або назально-орально шляхом дворазового занурення дзьоба птиці по носові отвори в робочий розчин вакцини та спостереження рефлексу ковтального руху. З моменту вакцинації птаха містять не менше 10 діб при допустимому оптимальному діапазоні температури навколишнього середовища 15-25°С (оптимум 20°С).
Відомості, що підтверджують можливість здійснення винаходу.
У дослідженнях застосовувалиживу вакцину проти пастерельозу водоплавних птахів зі штаму "К" Краснодарської НДВС (суху) і типовий збудник пастерельозу птахів Pasteurella multocida A:I серовара, найбільш поширений і повсюдно викликає захворювання (за нашими даними у 89% випадків епізоотії). Зокрема, використовували колекціоновані в різний час і з різних регіонів сильновірулентні контрольні штами пастерел ВДНК №55 і №712. Властивості слабовірулентних вакцинних та сильновірулентних контрольних штамів пастерел вивчали шляхом світлової мікроскопії, біологічної проби, ізоляції у фізіологічному розчині та культивування в рідкому та на щільному поживних середовищах. Як найбільш сприйнятливу до зараження пастерелами лабораторної біомоделі використовували організм голуба масою тіла 300-350 г. Препарати для мікроскопії фарбували за Гінсом, Романівським-Гімзом, Грамом. Досліди щодо вивчення способів щеплення живої вакцини, що включають умови вакцинації, ставили на каченях і гусятах з 15-добового віку, на підрощеному молодняку курей з 4-місячного віку та дорослих курях різних порід. Гострі досліди визначення специфічного імунітету ставили на качках і курях масою тіла 1700-2000 р. Специфічну резистентність птахів оцінювали за коефіцієнтом імунологічної ефективності (КІЕ, %).
Визначали залишкову вірулентність пастерел живої вакцини зі штаму "К" залежно від шляху введення в організм голубів, випробовували мікробні зразки: 1) вакцинні пастерели біофабричного виготовлення, сухі перед вивченням регідратовані з розрахунку 0,5 млрд. м.к. (доза вакцини) 0,5 мл фізіологічного розчину; 2) бульйонна культура капсульованих вакцинних пастерел 12-годинного віку (10 год при 37 і 2 год при 20°С), що містить близько 1 млрд. м.к./мл; 3) бульйонна культурабезкапсульних вакцинних пастерел 12-годинного віку (12 год при 37 ° С), що містить близько 1 млрд. м.к./мл. Шлях та доза введення зразків вакцинних пастерел голубам: внутрішньом'язово (ін'єкція в грудний м'яз) та інтраназально (на слизову носову та ротоглоткову порожнини) у кількості близько 300, 150 та 75 млн. м.к. 0,3 мл відповідно. На кожне зараження у випробуваній дозі використовували по 4 птахи. Біопробу ставили при 20-22 ° С навколишнього середовища. Термін спостережень був 7 діб. Потім визначали мінімальну летальну дозу (МДД) і за її величиною судили про залишкову вірулентність досліджуваних зразків пастерелл, приготованих з вакцинного штаму "К", Результати біологічних досліджень наведені в табл.1.