Спосіб виявлення кровоносних судин на гістологічних препаратах
Про Il І С А Н І Е) 957046
До СВІДОЦТВОМ (61) Додаткове до авт. свид-вувЂ" (22) Заявлено 02.03.81 (21) 3254201/28-13 з приєднанням заявки №вЂ" (23) ПріоритетвЂ" (51) М. Кл.
СРСР (53) УДК 616-091..8 (088.8) Опубліковано 07.09.82. Бюлетень №33
Г. Л. Зельцер та Е. М. Тарарак з (72) Автори винаходу
1 (Ордена Трудового Червоного Прапора науково- "дослідний інститут експериментальної-медійної АМН "ГСР (71) Заявник (54) СПОСІБ ВИявлення КРОВЕНОСНИХ СУДИН
НА ГІСТОЛОГІЧНИХ ПРЕПАРАТАХ
Винахід відноситься до медицини, а саме до морфології і може бути використане при гістохімічному дослідженні зрізів кровоносних судин.
Відомий спосіб виявлення кровоносних судин на гістологічних препаратах шляхом забарвлення їх протруйними барвниками (гематоксиліном, бразиліном, карміном) та подальше диференціювання солями тривалентного заліза (1).
Проте відомий спосіб тривалий за часом і дозволяє отримати необхідного рівня контрастності структур кровоносних судин.
Відомий також спосіб виявлення кровоносних судин на гістологічних препаратах залізним гематоксилином по Гег-15 квісту, що полягає у фарбуванні 1%-ним розчином гематоксиліну до виявлення бажаних структур у зрізах, попередньо протруєних в 5О/о-ном розчині хлорного заліза протягом 5 хв. Вся процедура виявлення займає 8 вЂ" 10 хв. (2).
Однак існуючий спосіб виявлення не дозволяє контрастно диференціювати потрібні структури кровоносних судин.
Метою винаходу є підвищення якості препаратів гістологічних.
Ціль досягається тим, що згідно з способом виявлення кровоносних судин на гістологічних препаратах шляхом їх протруюваннясолями тривалентного заліза і фарбування відмінною особливістю є те, що зрізи після фарбування обробляють 1%-ним розчином трилону при 45 вЂ" 50 С.
Пропонований спосіб здійснюється наступним чином.
Зрізи кровоносних судин протруюють солями тривалентного заліза (наприклад, хлористим залізом, залізо-амонійними галуном). Концентрація розчинів та час протруювання залежить від вибору солі, типу кровоносної судини та товщини зрізу. Потім зрізи забарвлюють одним із протруйних барвників, наприклад, гематоксиліном або бразиліном. Причому фарбування проводять з невеликим перефарбовування структур, що досліджуються. Після цього на зрізи наносять 1%-ний розчин трилону при 45 вЂ" 50 С, за допомогою якого виробляють диференціювання потрібних структур.
Упорядник С. Малютіна
Редактор Л. Гратілло Техред А. Бойкас Коректор Є. Рошко
Замовлення 6585/30 Тираж 887 Передплатне
ВНДІПД Державного комітету СРСР у справах винаходів н відкриттів
113035, Москва, Ж вЂ" 35, Рауська наб., д. 4/5
Філія ПВП «Патент», м. Ужгород, вул. Проектна, 4
приклад. Виявляють коронарні артерії серця людини на гістологічних препаратах. Парафінові зрізи коронарних артерій, фіксованих в кальцій-формолі, монтують на предметних стеклах, після відведення окислюють в 0,5о/о-ном розчині марганцевокислого калію вЂ" 2 хв, промивають дистильованою водою, відбілюють 50о/о-ною щавлю
1 вЂ" 2 хв і знову промивають дистильованою водою. Окислення та відбілювання проводять для підвищення якості фарбування. Потім для протруювання наносять на зрізи 6 /оний розчин залізо-амонійних галунів, підігрівають над полум'ям спиртування до
45 вЂ" 50 З вЂ" 2 вЂ" 3 хв, зливають галун і, не промиваючи, наносять на зрізидля фарбування 1/р-ний розчин свіжоприготовленого гематоксиліну, також підігрівають над полум'ям спиртування до 45 вЂ" 50 С вЂ" 2 вЂ" 3 хв, домагаючись невеликого перефарбування структур, що досліджуються. Після промивання зрізів дистильованою водою для диференціювання наносять на них 1 /о-ний розчин трилону, і предметне скло знову підігрівають до 45 вЂ" 50 C . Диференціювання потрібних структур проводять під контролем мікроскопа протягом 1 вЂ" 3-х хв.
Внаслідок такого способу виявлення коронарних артерій серця людини на гістологічних препаратах було отримано контрастні зображення необхідних структур даних артерій на фарбованому тлі.
Використання запропонованого способу виявлення кровоносних судин на гістологічних препаратах забезпечує можливість отримання високої якості гістологічних препаратів не тільки одиничних, а й серійних за невеликих витрат часу і без участі висококваліфікованих лаборантів, а також виявлення більш тонких тканинних та клітинних структур кровоносних судин.
Спосіб виявлення кровоносних судин на гістологічних препаратах шляхом їх протруювання солями тривалентного заліза і забарвлення, який відрізняється тим, що, з метою підвищення якості гістологічних препаратів, зрізи після фарбування обробляють 1о/&g-ним розчином трилону при 45 вЂ" 50 С.
Джерела інформації, прийняті до уваги під час експертизи
1. Бенда, Гейденгайн, Ліллі P. Патогіс75 тологічна техніка та практична гістохімія. М., "Світ", 1969, с. 158.
2. Ромей Б. Мікроскопічна техніка.
М., Вид-во «Іноземна література», 1953, с. 164 вЂ" 165.