Фенотип антигенів еритроцитів та індекс сенсибілізації у донорів компонентів крові та пацієнтів г

Ж.К. Буркітбаєв, Р.Б. Меірбекова, Є.М. Курганська, Л.Л. Короп, Р.З. Магзумова

Науково-виробничий центр трансфузіології, м. Астана, Казахстан

Трансфузіологія №2, 2013

Резюме

В результаті проведеного дослідження встановлено велику різноманітність фенотипів у системі Резус, а також досить високий рівень сенсибілізації у реципієнтів та високий індекс сенсибілізації населення міста Астани.

Ключові слова:антигенний склад еритроцитів.

Запровадження

Дослідження поширеності у донорів основних клінічно значимих антигенів еритроцитів, визначення індексу алоімунізації є неодмінною умовою адекватної профілактики посттрансфузійних реакцій та ускладнень гемолітичного типу. Визначення групи крові, резус-приладдя та типування антигенів еритроцитів має велике значення при проведенні гемотрансфузій для підбору сумісних пар донор-реципієнт та профілактики найбільш небезпечних для життя реципієнтів посттрансфузійних ускладнень гемолітичного типу [1–16]. Методика аглютинації в гелі була розроблена з метою стандартизації реакцій гемаглютинації та отримання достовірних результатів. Тестування на індивідуальну сумісність крові донора та реципієнта з антигенів еритроцитів не замінює обов'язкове імуногематологічне дослідження, а лише доповнює його. Використання гелевої системи дозволяє знизити ризик зараження персоналу навіть під час роботи з потенційно інфікованими зразками [2]. Завдяки високій чутливості, стандартності та хорошій відтворюваності результатів, методи аглютинації в гелі набули широкого поширення [3].

Мета та завдання дослідження

Метою роботи було вивчення частоти народження антигенів еритроцитів і визначення рівня сенсибілізації населення р. Астани.

Матеріал та методи дослідження

Матеріалом дослідження служили 119882 зразки крові донорів та 6313 реципієнтів за період 2010–2012 рр. Вік донорів коливався від 18 до 60 років. Середній вік донорів становив 43,4±5,1 року. Вік хворих коливався від 0 до 77 років. Середній вік хворих становив 37,9±9,5 року. Серед донорів було 64736 чоловіків (54,0%) та 55146 – жінок (46,0%). Серед реципієнтів чоловіки становили 66,9%, жінки – 33,1%. Контингент обстежених пацієнтів: реципієнти, в анамнезі яких багаторазові трансфузії; вагітні, що входили до групи ризику з алоімунізації; діти із гемолітичною хворобою новонароджених. Всі зразки крові донорів досліджувалися на групову належність за системою АВО перехресним методом з використанням моноклональних антитіл, стандартних еритроцитів, а також методом мікроколонної аглютинації з використанням касет ORTHO BioVue. Зразки крові реципієнтів досліджувалися на групову приналежність до системи АВО із застосуванням гелевої методики Scangel. Антиген D з істеми Резус виявляли за допомогою Цоліклону АнтиD Супер (ТОВ «Гематолог», Москва) і із застосуванням методу мікроколонної аглютинації з використанням касет ORTHO BioVue, додатково всі RH(D)-негативні донори (3464 з 119 тисяч) досліджувалися наявність варіантних та слабких форм антигену D за допомогою моноклональних антитіл анти-RH1(D)/RhW1 у реакції Кумбса із застосуванням гелевої методики Scangel (Карти Scangel Кумбс анти-IgG, C3d), «BioRad Laboratories», США). Усі зразки крові донорів тестувалися на наявність антигену До системи Кell з використанняммоноклональних антитіл анти-К Супер (ТОВ «Гематолог», Москва) та за допомогою методу мікроколонкової аглютинації з використанням ORTHO BioVue анти-К. Всі RH(D)-негативні донори, а також «кадрові» RH(D)-позитивні донори були фенотиповані за антигенами С, с, Е, е системи. були фенотиповані за антигенами С, с, Е, е системи Резус за допомогою гелевого методу з використанням карток Scangel Моноклональні RH/Kell виробництва «Bio-Rad Laboratories», США. У всіх зразках крові донорів і реципієнтів було проведено скринінг антиеритроцитарних алоантитіл за допомогою реакції Кумбса, виконаної із застосуванням гелевої методики Scangel (Карти Scangel Кумбс анти-IgG, C3d), з еритроцитами Scangel I-II-III виробництва фірми «Bio-R , США-Франція). При позитивних результатах скринінгу проводилася ідентифікація антитіл з еритроцитами ScanPanel з 10 ліній клітин, Bio-Rad laboratories, США.

Результати та обговорення

Нами було проаналізовано розподіл груп крові системи АВО у донорів та реципієнтів (таблиця 1).

Отримані дані свідчать, що розподіл груп крові за системою АВО у донорів і пацієнтів подібні. Переважними є O та групи крові. Виявлена нами частота народження антигену А2 у групі крові А і АВ становить для донорів 0,32%, а для пацієнтів 3,2%. Виявлене нами співвідношення Rh(D)-позитивних та Rh(D)-негативних осіб серед пацієнтів склало 94,39 та 5,6% відповідно. Для донорів це співвідношення склало 92,43% Rh(D)-позитивних та 7,57% Rh(D)-негативних (табл. 2).

Отримані нами дані виявили значно більший відсоток антигенуD варіантного у пацієнтів. Можливо, це результат ослаблення антигену D при захворюваннях. Вивчення антигенного складу еритроцитів кадрових донорів та пацієнтів показало, що найбільш поширеним фенотипом серед Rh(D)-позитивних осіб є фенотип CCDee-, далі йдуть фенотипи CcDee-, CcDEe- та ccDEe- (табл. 3).

Найбільшу небезпеку становлять у трансфузійному відношенні гомозиготні поєднання антигенів системи Резус (СС, сc, ЇЇ та її), які зустрічаються у 86% резус-позитивних (D+). Всім донорам та реципієнтам незалежно від групової та резус- приналежності попередньо проводився скринінг на наявність антиеритроцитарних антитіл. При оцінці антиеритроцитарних антитіл у 13,3% пацієнтів виявлено імунні антитіла різної специфічності. У зв'язку з тим, що серед контингенту обстежених у лабораторії осіб переважали вагітні, які входили до групи ризику з алоімунізації, а також хворі, які отримали багаторазові трансфузії, – індекс сенсибілізації у пацієнтів виявився високим. Антитіла до антигенів еритроцитів Резус з'являються в організмі в результаті трансфузій еритроцитів донорів, що містять антигени, відсутні у реципієнта, а також при імунізації матері еритроцитами плода. Частота народження алоантитіл до антигенів еритроцитів системи Резус різна і визначається імуногенністю антигену і частотою народження в популяції. У 31% випадків антитіла не ідентифікували, що пов'язано з поєднаною специфічністю антитіл або наявністю антитіл до поширених в популяції антигенів. При вивченні частоти алосенсибілізації серед RH(D)-позитивних та RH(D)-негативних осіб було виявлено, що RH(D)-негативні люди імунізуються в 2-2,5 рази частіше, ніж RH(D)-позитивні. Антитіла до мінорнихАнтигени еритроцитів частіше зустрічаються у резус-позитивних осіб, ніж у резус-негативних. У донорів зустрічальність алоантитіл становила 0,46% (табл. 4).

Проблема гемолітичної хвороби новонароджених (ГБН) для міста Астана є актуальною. Найчастіше ГБН розвивається внаслідок конфлікту щодо антигенів системи Резус та АВ0 (табл. 5).