Облік ІФА при віч-інфекції Вестерн-блотт
Діагностичне та особливо прогностичне значення має показник співвідношення Т-хелперів до Т-супресорів (Тх/Тс).
Профілактика та хіміотерапія.Ефективної вакцини проти СНІДу не існує. Проводиться випробування генноінженерних вакцин, що містять поверхневі глікопротеїни вірусу. Слабка ефективність вакцин пояснюється високою мінливістю вірусу та іншими причинами. Запропоновано деякі хіміотерапевтичні препарати, які затримують репродукцію ВІЛ в організмі. Найбільш активним є азидотимидин (АЗТ) та дідеоксинозин (ДДІ), що інгібують зворотну транскриптазу. При хіміотерапії має місце тимчасове покращення стану хворих, повного одужання не настає. Застосовуються також імуномедіатори: інтерлейкін-2, інтерферон, тимозин, що полегшують стан хворих.
Онкогенні віруси
ОНКОГЕННЫЕ ВИРУСЫ (пухлинні віруси), збудники деяких природно виникаючих, і навіть багатьох експериментальних пухлин тварин. До онкогенних вірусів належать представники різних таксономічних груп вірусів (напр., аденовіруси), що відрізняються за низкою ознак: типу нуклеїнової кислоти, морфології віріонів, місцем розмноження в клітині (ядро, цитоплазма) та ін.
Онковірусологія - наука про онкогенні віруси. Гіпотеза про вірусне походження злоякісних пухлин було вперше висловлено 1907 р. Боррелем, а 1911 р. Раус представив докази існування вірусів, які викликають пухлини. Важлива роль розвитку онковирусологии належить нашому співвітчизнику, видатному вченому Л.А. Зільберу, який сформулював вірусогенетичну теорію раку. Відповідно до цієї теорії, злоякісні новоутворення розвиваються внаслідок впливу на клітини онкогенних вірусів, геноми яких повністю або частково інтегрують у геном клітинигосподаря. Вірус спадково змінює нормальну клітину в пухлинну. Інтегровані провіруси перебувають у латентному стані та активуються під дією канцерогенних факторів хімічної та фізичної природи.
Вірусогенетична теорія походження раку дуже відрізнялася від класичної вірусологічної теорії походження раку, висловленої Боррелем. Згідно з теорією Борреля, вірус, що викликає рак, є інфекційним агентом. За Зільбер все відбувається інакше - віруси спадково перетворюють нормальну клітину в пухлинну і не відіграють ніякої ролі в подальшому розвитку неопластичного процесу.
Прогрес онковірусології безпосередньо пов'язаний з роботами Нобелівських лауреатів 1975 р. в галузі медицини Дульбекко, Теміна і Балтімора, які зробили суттєвий внесок у розуміння механізмів інтеграційних взаємодій онкогенних вірусів із клітиною.
Онкогенними (пухлинними) є віруси, здатні трансформувати клітини в культурі, індукувати утворення пухлин у лабораторних тварин і в ряді випадків викликати злоякісне переродження клітин in vivo, тобто бути етіологічним агентом раку.
У загальнобіологічному сенсітрансформація- це внесення екзогенної ДНК у клітину. Чужорідна ДНК може інтегрувати до ДНК господаря, а може цього не робити. При характеристиці пухлинних вірусів під трансформацією розуміють індукування стану неконтрольованого зростання клітин еукаріотів, яке має багато спільного або збігається з пухлинним переродженням клітин. На практиці трансформованою називають таку клітину, яка набула стійких ростових властивостей, не характерних для батьківської клітини. Пухлинні віруси можуть бути як ДНК-содержащим і, так і РНК-содержащими.
Пухлинні РНК-вірусиє представники п'яти пологів ретровірусів(Retroviridae)- Alpharetrovirus (вірус мієлобластозу птахів - AMV, вірус саркоми Рауса - RSV), Betatetravirus (вірус пухлин молочних залоз мишей - MMTV), Gammaretrovirus (вірус лейкемії мишей - MuL Deltaretrovirus (вірус лейкозу великої рогатої худоби, вірус T-клітинного лейкозу людини – BLV, HTLV), Epsilonretrovirus (вірус лейкоми рогівки – WDSV).
(Ретровіруси можуть викликатиінфекційну анемію коней).
Ретровіруси, як правило, не вбивають клітину, а викликають хронічну інфекцію, для досягнення якої геном здійснює стратегію збереження ДНК-копії свого геному в геномі клітини господаря у формі клітинних генів - ендогенних провірусів. Ця незвичайна властивість ретровірусів у разі інтеграції в ДНК клітин зародкової лінії дозволяє вірусу передаватися вертикально згідно із законом Менделя. Ряд інших ретровірусів (екзогенні ретровіруси) передаються від господаря до господаря горизонтально.
Віріони мають діаметр 80-130 нм. Є електроноплотним нуклеоїдом, оточеним одно- або двошаровою ліпідмістою оболонкою, що має глікопротеїнові поверхневі шипи. Нуклеоїд - це РНП, оточений, у свою чергу, ікосаедричний капсидом. Між оболонкою та капсидом розташований ізометричний матриксний білок.
По морфології виділяють чотири типи віріонів ретровірусів: A, B, C і D. Частинки типу A - безоболонкові, виявляються лише всередині клітин, не інфекційні. Для часток типу B характерне асиметричне розташування нуклеоїду, формування віріону в цитоплазмі та придбання оболонки у процесі брунькування. У віріонів типу C формування віріону відбувається після брунькування. Нуклеоїд розташовується у центрі частки. Частинки типу D також характеризуються центральним становищемнуклеоїду, проте формування віріону відбувається у цитоплазмі.
Відмінною особливістю ретровірусів є наявність у складі віріону РНК-залежної ДНК-полімерази (ревертази), що здійснює синтез ДНК на геномній матриці РНК.
Геном ретровірусів диплоїден, представлений двома ідентичними плюс-нитками РНК розміром 3,5-9 т.зв. Геномні РНК є мРНК і мають 5'-кінцеву кеп-структуру та 3'-полі-A послідовність. З 5'-кінцем кожної РНК пов'язана, специфічна кожного вірусу, клітинна тРНК, яка грає роль затравки в синтезі ДНК-копії.
Реплікація геному ретровірусів на перших стадіях протікає у цитоплазмі, далі – у ядрі. Виділено три незвичайні властивості реплікації:
- Наявність зворотної транскрипції;
- Дуплікація кінцевих послідовностей РНК з утворенням довгих кінцевих повторів (LTR);
- Інтеграція ДНК в геном клітини господаря в строго певній орієнтації.
Для реплікації ретровірусів необхідні три гени: gag - кодує білки серцевини, pol - кодує зворотну транскриптазу, env - кодує білки оболонки. Крім цього, геном низки ретровірусів містить мінігени, які не беруть участь у реплікації та виконують регуляторну функцію.
Крім наявності у реплікації стадії зворотної транскрипції та існування деяких вірусів у формі ендогенних провірусів, пухлинні ретровіруси мають ще одну незвичайну властивість.
Воно полягає в тому, що ці віруси містять гени, дуже близькі до висококонсервативних клітинних генів і здатні викликати трансформацію клітин у культурі. Такі гени підвищують онкогенний потенціал вірусу, але не потрібні для реплікації. Це так звані трасформуючі гени абоонкогени. Їх позначають v-onc, а відповідні клітинні гени c-onc. таких геніву клітині багато тепер вони визначені, їх функції вивчені. Онкогени позначають трьома літерами, наприклад, myc, sis, myb. Вірусні онкогени - це дещо змінені клітинні онкогени, тобто ряд ретровірусів є переносником онкогенів клітини.
R - прямий поворот, 30-60 н. U5 - унікальна 5'-послідовність, 80-120 н. U3 - унікальна 3'-послідовність, 17-1200 н. Pbs - ділянка приєднання тРНК, 15-20 н. Pu - сайт праймування другого ланцюга ДНК. Gag, pol, env - гени, що у реплікації. pX – мінінгени, що кодують NS фактори трансформації. У реплікації не беруть участі.Структурна організація геному онкогенних ретровірусів на прикладі вірусу Т-клітинного лейкозу людини (HTLV)
За наявністю або відсутністю онкогенів у геномі ретровіруси поділяють на onc+ та onc-. Всі onc+ ретровіруси здатні до трансформації, але дефектні за реплікацією, для здійснення якої потрібна присутність недефектного onc-ретровіруса. Вбудовування дефектних onc+ онкогенів у геном ретровіруса призводить до його інактивації за рахунок делетування частини гена, що бере участь у реплікації. Присутність у клітині, поряд з дефектним v-onc+, нормального v-onc-ретровірусу викликає гостру трасформацію та загибель клітин, оскільки онкоген кодує білок трасформації.
Дефектними v-onc+ ретровірусами є вірус пухлин молочних залоз мишей (MMTV), вірус лейкемії мишей (MuLV), вірус мієлобластозу птахів (AMV). Винятком із правила дефектності є вірус саркоми Рауса, який зберіг здатність до трансформації клітин, і до реплікації. Геном цього вірусу на 1 т.зв. довше геному інших ретровірусів, оскільки вірус є рекомбінантом між дефектним вірусом та вірусом-помічником і містить src-onc, вбудований у ген поверхневих білків вірусу(Ген gag).
Відсутність гена onc у ретровірусів не є умовою відсутності пухлинності. Існує група HTLV-подібних лімфотропних ретровірусів, що є v-onc-, але викликають злоякісні переродження клітин імунної системи. Ця група онкогенних ретровірусів включає віруси T-клітинного лейкозу (лейкемії) людини HTLV-1, HTLV-2, вірус лейкемії бика (BLV) та вірус T-клітинної лейкемії мавп (STLV). Ці віруси викликають гострі інфекції, що супроводжуються імунодефіцитом через злоякісне переродження CD4+ T-лімфоцитів (рак крові), що призводить до зниження кількості нормальних T-хелперів. Віруси передаються як горизонтально (статевим шляхом, при гемотрансфузіях), і вертикально (від матері — плоду). Можуть переноситись комарами.
Трансформуючі властивості вірусів T-клітинного лейкозу обумовлені особливостями детермінованими геномом. Як і інші ретровіруси, HTLV-подібні віруси мають провірусний геном розміром 9,032 т.п.н., що містить на двох кінцях LTR і інтегрований до генома господаря у випадковому місці. Однак крім трьох основних OPC (гени gag, pol, env), проген має додаткову рамку зчитування pX, розташовану на 3'-кінці нуклеотидної послідовності (схема 10). Ця область геному кодує три неструктурні фосфопротеїни - p40tax, p27rex і p21x (трансформуючі фактори). Встановлено, що p40tax є активатором транскрипції провірусу, p27rex - модулятор транспорту мРНК з ядра в цитоплазму. P40tax активує транскрипцію провірусних генів опосередковано через ДНК-зв'язані білки, розташовані на транскрипційному енхансері LTR. Однак цей вірусний фактор активізує не тільки енхансер провірусу, але й інші структурно не пов'язані з LTR енхансери транскрипції клітинних генів. При цьому активізуєтьсятранскрипція генів, функція яких пов'язана з індукцією безперервного зростання клітин - гени інтерлейкіну-2, рецептора інтерлейкіну-2 та ген c-Fos.
До пухлинних ДНК-вірусів відносяться представники п'яти сімейств вірусів: поліомавіруси, папіломавіруси, аденовіруси, герпесвіруси, гепаднавіруси. Слід зазначити, що не всі віруси цих сімейств мають онкогенний потенціал. Крім того, пухлинні віруси цих сімейств, володіючи трансформуючою здатністю, не завжди здатні викликати рак (таблиця).