Життєздатність заморожених тканин щитовидної залози та паращитовидної залози ссавців
Щитовидна залоза є першою залозою, для якої було показано, що її структурні одиниці, судячи з гістологічного дослідження аутотрансплантатів, є стійкими до впливу дуже низьких температур.
У морських свинок вирізали щитовидні залози або занурювали їх безпосередньо в рідкий азот на 10 хв, або поміщали в запечатаних ампулах ємністю 20 мл на 24 годину в судини з твердою вуглекислотою. Після відтавання їх імплантували тим самим тваринам у підшкірну кишеню на передній стінці живота. Через 13 днів після аутотрансплантації щитовидних залоз, витриманих 24 години при температурі -79 °, 9 тварин забили. В однієї морської свинки тканина паращитовидної залози, що добре збереглася, оточувала центральну ділянку пухкої сполучної тканини, що містить коричневий пігмент і фагоцити. Інша тварина виявила ділянку тканини щитовидної залози, що складається з маленьких фолікулів, вистелених кубічним епітелієм. В одній із клітин спостерігався мітоз, що й розглядалося як показник життєздатності тканини. У 7 морських свинок під час обстеження на 13-й день у трансплантатах було виявлено некротизовану тканину. Гістологічне дослідження проводили через 11, 13 чи 15 днів після імплантацій. У контрольних дослідах при імплантації незамороженої тканини здебільшого центральної ділянки щитовидних залоз протягом перших 24 годин наступав некроз. В області некротизованої тканини відзначалася інвазія фібробластів, і до 13 дня тканина була повністю заміщена. Лише на 20 день спостерігалася значна регенерація фолікулів щитовидної залози. Отримані результати показують, що гістологічне дослідження трансплантатів замороженої тканини не має сенсу проводити раніше ніж через 20 днів після імплантації.
Семи морським свинкам протягом 3-4 днівдавали тиротропін. У кожної тварини брали часточку щитовидної залози і заморожували при -190° протягом 10 хв. Потім часточку залози розморожували та імплантували тій же морській свинці, у якої її вирізали. З 7 тварин 4 загинули за три дні. У вилучених після смерті трансплантатах, що добре збереглися, не було виявлено жодних ознак некрозу. Дві інші морські свинки загинули на 5 день. У центральній частині аутотрансплантатів спостерігався некроз, але периферичні фолікули добре збереглися. Остання морська свинка вижила, але через 11 днів трансплантат повністю заміщений сполучною тканиною. Блюменталь і Уолш дійшли висновку, що швидке охолодження до -190 °, під час якого, очевидно, відбувається вітрифікація всередині - і позаклітинної води, викликає менше пошкодження щитовидної залози, ніж повільне охолодження до -79 °, що супроводжується процесом заморожування. Однак недоцільно порівнювати трансплантати, взяті у тварин, що загинули через 3-5 днів після імплантації, з трансплантатами, взятими на 13-й день у живих тварин. Коли рідкий азот занурюють такий великий шматочок тканини, як щитовидна залоза морської свинки, навряд чи він охолоджуватиметься настільки швидко, що відбудеться вітрифікація поза - і внутрішньоклітинної води. Процес охолодження тут дещо уповільнений, оскільки бульбашки газу, що обволікають тканину, ізолюють її від впливу холодного середовища. Як би там не було, швидкість охолодження може відігравати меншу роль, ніж тривалість впливу дуже низької температури. Як правило, не слід порівнювати життєздатність тканин, що швидко заморожені при одній температурі, і тканин, повільно заморожених при іншій температурі. Цікаво, що у дослідах Блюменталя та Уолша з чотирьох щитовидних залоз, занурених на 10 хв у рідкий азот тащо зберігалися протягом 24 годин при температурі 79°, дві чудово збереглися, як показало гістологічне дослідження, проведене через 11 днів після аутотрансплантації. Фолікули були вистелені кубічним та циліндричним епітелієм, а, крім того, деякі клітини перебували на стадії мітозу.
Паркс при дослідженні функціонального стану замороженої та незамороженої тканини щитовидної залози стежив не тільки за зростанням тироїдектомованих тварин, яким імплантували щитовидну залозу, а й за поглинанням радіоактивного йоду (I 131 ) трансплантатами, що прижили. Щури, яким імплантували тканину щитовидної залози, заморожену при -79° у сироватці без гліцерину, відставали у своєму зростанні, а поглинання радіоактивного йоду в трансплантатах було незначним. А щури, яким імплантували тканину, охолоджену до —79° у сироватці з додаванням 15% гліцерину, зростали нормально. Крім того, у таких трансплантатах спостерігалося гарне поглинання радіоактивного йоду.
Опублікована 1950 р. робота Блюменталя і Уолша викликала особливий інтерес. Вона зародила сумнів у правильності теорії, згідно з якою передача злоякісних пухлин від однієї особини іншій при імплантації ракових, саркоматозних та лейкемічних клітин цілком залежить від наявності вірусу. Ця теорія була вперше висунута в 1908 р. Салвін-Муром і Барретом і знайшла підтвердження у зробленому згодом відкритті, що куряча саркома Рауса, біттнерівська карцинома молочної залози у мишей та деякі пухлини у кроликів передаються ультрафільтратами безклітинних екстрактів. Вказану теорію підтримували також Гі, Манн та деякі їхні співробітники. Вони вважали, що пухлинні клітини гинуть при заморожуванні та відтаванні. Той факт, що пухлини вдавалося переносити від однієї тварини до іншоїдопомогою тканини, що піддавалася заморожуванню при -79 ° або ліофілізації, служив, на їхню думку, переконливим доказом зв'язку будь-якого новоутворення з присутністю вірусів, які, як відомо, переживають таку обробку. Досліди щодо трансплантації замороженої тканини щитовидної залози показали виживання та розмноження здорових клітин після зберігання при дуже низьких температурах. Таким чином, немає потреби залучати вірус для пояснення розвитку раку після імплантації свіжих або заморожених злоякісних клітин. Виняток становлять такі особливі випадки, як згадані вище куряча саркома Рауса та карцинома молочної залози у мишей. Роботи Пассі та його співробітників підтверджують правильність погляду, що передача різних пухлин шляхом імплантації замороженого або ліофілізованого матеріалу пов'язана з виживанням деякої кількості злоякісних клітин. Частка клітин, що вижили, залежить від природи пухлини, складу навколишнього середовища і методики ліофілізації. Питання про життєздатність заморожених пухлин розглянули Білліїгем та Креги.