Гестагенні гормони та їх напівсинтетичні аналоги
У медичній практиці застосовують лікарські препарати природного гормону прогестерону та його напівсинтетичні аналоги норетистерон та медроксипрогестерону ацетат. Вони є похідними прегнана. Прогестерон може бути отриманий з гормонів жовтого тіла свиней та напівсинтетичним способом із соласодину як проміжний продукт синтезу кортизону (див.).
Вихідними продуктами промислового синтезу можуть також служити холестерин, діосгенін, 17-кетостероїди. Проміжним продуктом при синтезі прогестерону з холестерину є прегненолон, який піддають мікробіологічного дегідрування до прогестерону:
Цей процес аналогічний біосинтезу прогестерону в організмі.
Норетистерон є похідним 19-нортестостерону, містить у молекулі етинільний радикал. Медроксипрогестерону ацетат - ацетильне похідне 6-метил-17-гідроксипрогестерону.
47.5. Властивості гестагенних гормонів та їх напівсинтетичних аналогів
За фізичними властивостями прогестерон, норетистерон та медроксипрогестерону ацетат – білі або з жовтуватим відтінком кристалічні речовини (табл. 47.5). У воді вони практично нерозчинні, в етанолі прогестерон розчинний, а норетистерон мало розчинний. У хлороформі прогестерон дуже легко розчинний, медроксипрогестерону ацетат легко розчинний, норетистерон розчинний. Прогестерон помірно розчинний в ефірі і мало розчинний у рослинних оліях. Норетистерон легко розчинний у піридині, розчинний в ацетоні.
Для випробування справжності прогестерону ФС рекомендує кольорову реакцію на наявність стероїдного циклу з концентрованою сірчаною кислотою. Після додавання 3 мл води утворюється жовте фарбування із зеленою флуоресценцією. Після додавання хлороформу обидва шари стають безбарвними. Спиртовий розчинпрогестерону утворює зм-динітробензолом у лужному середовищі забарвлене в червоний колір сполуку.
По ФС прогестерон ідентифікують за допомогою ІЧ-спектру, знятого у вазеліновому маслі в області 3700-400 см -1. Він повинен повністю збігатися з малюнком спектру, що додається до ФС.
УФ-спектрофотометрію, засновану на вимірюванні оптичної густини при 241 нм (максимум світлопоглинання), застосовують для ідентифікації прогестерону. Для норетистерону НД вказує максимум поглинання 240 нм. Як розчинник використовують етанол.
Реакція утворення оксиму за рахунок наявності кетогрупи в положенні стероїдного циклу 3 може бути використана для випробування справжності норетистерону:
Реакцію осадження 2,4-динітрофенілгідразону використовують для кількісного визначення прогестерону (гравіметричним методом) та для випробування його автентичності (за температурою розкладання 2,4-дінітрофенілгідразону):
Наявність спиртового гідроксилу в молекулі норетистерону дозволяє використовувати для випробування на справжність реакцію ацетилювання:
Ацетат норетистерону - біла кристалічна речовина (т. пл. 158-163 ° C), розчинна в етанолі, ацетоні та хлороформі.
Справжність медроксипрогестерону ацетату підтверджують також позитивною реакцією на ацетильовані сполуки (див. кортизону ацетат).
Норетистерон можна кількісно визначити шляхом непрямої нейтралізації. У його основі лежать такі хімічні реакції:
Атом водню етинільного радикала заміщується катіоном срібла, утворюючи ацетиленід срібла. Еквівалентна кількість азотної кислоти, що виділилася, відтитрують гідроксидом натрію.
Кількісне визначення прогестерону по ФС виконують спектрофотометричним методоммаксимумі поглинання (241 нм), використовуючи як розчинник етанол. Розрахунок вмісту у перерахунку на суху речовину виконують за величиною попередньо встановленого питомого показника поглинання (535).
Визначення вмісту норетистерону у таблетках виконують методом УФ-спектрофотометрії при 263 нм, порівнюючи оптичну густину зі стандартним зразком.
Описані способи аналізу прогестерону та його синтетичних аналогів методом ВЕРХ на колонках з прямою та оберненою фазами. Методика контролю якості суміші стероїдних сполук прегнанового ряду передбачає такі критерії поділу як час утримування, селективність, дозвіл. Відповідно до вимог НД фірм, що виробляють медроксипрогестерону ацетат, випробування на справжність, однорідність дозування, наявність сторонніх домішок і кількісне визначення виконують методом ВЕРХ. Справжність підтверджують за порівнянним часом утримання основного піку на хроматограмі у випробуваного та стандартного зразків. Останні використовують як внутрішній стандарт при виконанні кількісного визначення.
Прогестерон, норетистерон та медроксипрогестерону ацетат зберігають за списком Б, у сухому місці, у добре закупореній тарі, що оберігає від дії світла, при температурі не вище 20-25 °C. Застосовують як гестагенні препарати. Прогестерон призначають у вигляді 1% або 2,5% розчинів в маслі для ін'єкцій. Норетистерон зберігає активність під час під'язикового застосування. Його призначають у вигляді таблеток Норколут, що містять по 0,005 г норетистерону. Медроксипрогестерону ацетат виявляє не тільки гестагенну, а й протипухлинну дію, особливо при раку матки та молочної залози. Призначають його внутрішньо у таблетках по 0,1-0,4 г, а також у вигляді розчинів для ін'єкційампули по 150 мг/мл. Депо-перевірка вводять внутрішньом'язово у вигляді суспензії по 3,3 мл (0,5 або 0,15 г на 1 мл).